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眼外伤(ocular trauma)是视力损害的主要原因,尤其是单眼失明的首要原因,其中常见的有外伤性视神经病变(traumatic optic neuropathy, TON),导致难以治愈的继发性或原发性视力丧失,致伤原因可以是头部或眶部受伤,间接引起视神经受伤,也可以是直接的完全性横断伤。视神经损伤后经过一系列较为复杂的病理过程,诸多因素影响到受损视神经的修复再生,然而受损视神经的修复再生是最终治疗TON的唯一途径。因此,寻找有效的手段促进视神经再生及其机制成为神经生物学科的研究热点。在大鼠视神经损伤后促进视网膜神经节细胞再生的实验研究中,损伤晶状体并形成白内障在上述过程所起的作用逐渐被认可,其机制也被国内外众多学者关注。睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)及白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)做为白细胞介素6家族成员,玻璃体内注入外源性CNTF能促进视网膜神经节细胞的再生,然而内源性CNTF/LIF是否参与晶状体损伤促进视神经再生这一过程一直鲜见报道,在此我们通过动物实验研究进行了相关探索。目的观察晶状体的损伤能否促进视神经损伤后视网膜神经节细胞再生,检测GAP-43、CNTF及LIF在视网膜的表达情况,初步探讨其在晶状体损伤促进视神经再生过程中的作用机制。方法选取56只成年健康无眼疾的Wistar大鼠,雌雄不限,按照随机化原则分为3组：正常组(8只大鼠)、单纯损伤组(24只大鼠)和联合损伤组(24只大鼠)。正常对照组在饲养7天后摘除眼球；单纯损伤组、联合损伤组于术后7天、14天及21天摘除术眼,每组在每个时间点分别摘除8只眼球,常规HE染色观察视网膜组织病理学变化；利用免疫组化及Biosens Digital Imaging System v1.6系统检测生长相关蛋白-43(growth associated protein-43, GAP-43)、CNTF及LIF在视网膜的表达并进行量化,统计分析所得数据。结果1.大鼠视网膜HE染色：正常组视网膜各层排列规律,层次清晰；单纯损伤组,视网膜厚度下降明显,神经纤维层近消失,视网膜神经节细胞缺失较多、极其稀疏,可见大量空泡及炎性细胞,内丛状层及外丛状层疏松变薄,内颗粒层及外颗粒层细胞数量减少,排列不均匀；联合损伤组,视网膜的厚度轻度下降且神经纤维层依然存在,视网膜神经节细胞数量减少,但较单纯视神经损伤组数量增加,可见少量空泡,内颗粒层及外颗粒层稍稀疏,内丛状层及外丛状层略变薄。2.大鼠视网膜GAP-43免疫组化染色：正常组视网膜几乎没有表达,积分光密度值为59.49±0.99/鼠。单纯损伤组术后7天少量表达,积分光密度值为80.98±1.62/鼠；14天及21天积分光密度值分别为60.44±1.29/鼠、59.34±1.32/鼠。14天及21天积分光密度值均较7天组低,差异有统计学意义(P=0.000),术后14天及21天时积分光密度值与正常组差异无统计学意义(14天组与正常组相比P=0.118；21天组与正常组相比P=0.784)。联合损伤组术后7天见GAP-43阳性细胞,积分光密度为121.70±1.99/鼠；术后14天及21天积分光密度值分别为122.94±1.19/鼠、122.20±1.09/鼠；各时间点的积分光密度值较正常对照组均增高,差异均有统计学意义(P=0.000),但各时间点积分光密度值相比,差异无统计学意义(P=0.26)。7天时,各处理组间积分光密度值的差别均有统计学意义(P=0.000)；14天及21天时,除正常组与单纯损伤组外,其他各比较组之间积分光密度值的差别均有统计学意义(P=0.000)；3.大鼠视网膜CNTF/LIF免疫组化染色：正常组有少量CNTF及LIF表达,其积分光密度值分别为70.25±1.14/鼠、68.55±0.68/鼠。单纯损伤组7天CNTF积分光密度值为84.63±0.87/鼠,高于正常组且具有统计学意义(P=0.000)；14天CNTF阳性区积分光密度值为61.33±0.66/鼠,低于7天组及正常组且均有统计学意义(P=0.000)。联合损伤组术后7天、14天CNTF的积分光密度值分别为121.48±0.87/鼠、121.30±0.71/鼠,较正常对照组均增高,差异均有统计学意义(P=0.000),2个时间点相比,差异无统计学意义(P=0.667)。7天及14天时,三个处理组的积分光密度值之间的差异有统计学意义(P=0.000),且各处理组间积分光密度值的差别均有统计学意义(P=0.000)。术后7天时,单纯损伤组及联合损伤组LIF的表达积分光密度值分别为81.27±0.69/鼠、120.21±0.61/鼠,较正常组均有增加,有统计学意义(P=0.000)；LIF的表达在联合损伤组高于单纯损伤组,有统计学意义(P=0.000)。结论1.视神经完全横断后,损伤晶状体使视网膜GAP-43稳定持续高表达,促进视网膜神经节细胞轴突再生2.晶状体的损伤显著促进视网膜内源性CNTF的表达,且持续稳定。3.内源性CNTF/LIF参与晶状体损伤促进视神经再生的过程。