迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)作为一种广泛分布的药用植物,其叶中含有多种生物活性物质,其中鼠尾草酸具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、保护中枢神经系统、护肝护胃、降低血糖血脂等一系列重要的药理和生物活性,在食品、医药保健、化妆品和香料等方面具有广泛的应用。本文以迷迭香叶为原料,研究了迷迭香叶中鼠尾草酸的分离纯化工艺。同时,通过自由基清除能力、还原力和平板二倍稀释法实验,评价了鼠尾草酸的抗氧化活性、抑菌活性。以迷迭香叶为原料,采用3步骤复合提取纯化方法制备鼠尾草酸,第一步:迷迭香叶经超声辅助乙醇提取,得到迷迭香提取物;第二步:迷迭香提取物经超声辅助正己烷提取和p H调节,得到鼠尾草酸粗品;第三步:鼠尾草酸粗品经硅胶柱层析,得到鼠尾草酸纯品。单因素试验的结果表明:第二步操作的合理条件为:液固比20:1(m L/g)、超声频率28 k Hz、超声时间40 min、超声功率140 W;第三步操作的合理条件为:200~300目的硅胶40 g、洗脱剂为乙酸乙酯:石油醚=4:7(v/v)、洗脱剂流速6 m L/min、负载量为0.3 g。通过此种方法得到的鼠尾草酸纯度≥95%。然后,在三步法的基础上探索两步法分离纯化鼠尾草酸。以迷迭香叶为原料,采用两步法分离纯化鼠尾草酸,第一步:迷迭香叶经超声辅助乙醇提取,得到迷迭香提取物;第二步:迷迭香提取物经硅胶柱层析,得到鼠尾草酸纯品。单因素试验的结果表明:第二步操作的合理条件为:200~300目硅胶50 g、洗脱剂为乙酸乙酯:石油醚=4:13(v/v)、洗脱剂流速4 m L/min、负载量为0.5 g。通过此种方法得到的鼠尾草酸纯度≥97%。同时,对实验所得物质进行紫外、红外、核磁、质谱验证,证明所得物质为鼠尾草酸。采用当前公认的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁还原力3种体外抗氧化活性检测与评价方法对鼠尾草酸与多种常见的合成抗氧化剂的抗氧化性能进行比较。结果表明:鼠尾草酸具有比合成抗氧化剂PG、BHT、BHA,VE更好、仅次于TBHQ的抗氧化性能,可在较低的浓度水平发挥较强的抗氧化能力,其清除DPPH自由基的IC50值为2.53μg/m L,清除ABTS自由基的IC50值为51.58μg/m L。通过平板二倍稀释法对鼠尾草酸与常见的3种抗菌剂新洁尔灭(苯扎溴铵)、氨苄青霉素钠、红霉素对6种不同菌种的最低抑菌浓度进行测试和评价。抑菌实验表明:鼠尾草酸具有广谱抗菌性,特别是对大肠埃希氏杆菌、绿脓假单胞菌,其最低抑菌浓度分别为4和<2μg/m L,表现出了比新洁尔灭、氨苄青霉素钠、红霉素更好的抑菌活性;对于肺炎克雷伯氏菌,则表现出了与红霉素同样的抑菌效果,优于新洁尔灭和氨苄青霉素钠。迷迭香叶中鼠尾草酸的分离纯化和其生物活性研究,为迷迭香资源的综合开发利用奠定理论和应用基础,为活性物质鼠尾草酸拓展更广泛的应用。