天然高分子及多肽修饰的碳酸钙共沉淀基因及药物传递体系研究

来源 :武汉大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hhenry123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
高效安全的基因和药物传递载体在基因传递与药物控制释放方面具有重要的意义。在基因传递领域,由于病毒载体存在很大的安全隐患,非病毒载体具有安全性高、免疫反应小的优势。然而,在非病毒载体中,被广泛研究的阳离子高分子载体和脂质体的生物相容性仍不尽人意,与之相比,无机化合物(如碳酸钙、磷酸钙)/基因共沉淀传递体系具有更好的生物相容性。在药物传递领域,纳米、微米无机化合物(如碳酸钙、磷酸钙)粒子也是一类重要的药物载体。本论文的研究主要集中在天然高分子和多肽改性的无机化合物基因及药物共沉淀体系,研究了它们的基因与药物传递性能。第一章中概述了基因与药物传递的研究现状。重点介绍了基于非病毒载体的基因传递以及基因与药物共传递系统的研究进展。第二章的研究内容为天然高分子改性碳酸钙基因及药物传递体系。为了提高碳酸钙体系的基因与药物传递效率,将水溶性天然高分子海藻酸引入共沉淀体系中得到alginate/CaCO3/DNA纳米粒子。纳米粒子的尺寸和zeta电位用粒径电位仪测量。由于海藻酸能够控制碳酸钙结晶并形成亲水性外层,alginate/CaCO3/DNA纳米粒子呈现出较小的粒径和较强的稳定性。为了考察该体系基因与药物共传递性能,将水溶性抗肿瘤药物盐酸阿霉素负载到纳米粒子上形成alginate/CaCO3/DNA/DOX纳米粒子。以pGL3-Luc作为报告基因考察了不同纳米粒子对293T和HeLa两种细胞的转染效率。在基因传递体系和基因与药物共传递体系中,当加入海藻酸钠量为最优化条件时,经海藻酸修饰的纳米粒子的转染效率都能够明显的提高。细胞生长抑制实验结果表明细胞存活率随着alginate/CaCO3/DNA/DOX纳米粒子中负载的DOX增多而降低。海藻酸修饰能够明显提高碳酸钙共沉淀体系传递基因与药物的效率。第三章的研究内容为用于抗癌药物与基因共传递的海藻酸修饰的碳酸钙共沉淀体系。利用共沉淀技术,将抗肿瘤药物盐酸阿霉素和治疗基因p53高效地包封在alginate/CaCO3/DNA/DOX纳米粒子中。Alginate/CaCO3/DNA/DOX纳米粒子体外细胞抑制效果由MTT法测定。实验结果显示,该纳米粒子对HeLa细胞生长抑制率达到80%,表明纳米粒子能够有效的将基因与药物传递到细胞中。与基因与药物的联合作用相比,基因与药物单独使用时对细胞生长的抑制效果明显下降。和未经修饰的CaCO3/DNA/DOX纳米粒子相比,具有较小的粒径的alginate/CaCO3/DNA/DOX纳米粒子具有较高的传递效率。第四章的研究内容为多肽改性碳酸钙基因及药物传递体系。为了提高传递效率,将阳离子穿膜肽KALA引入共沉淀体系得到多肽功能化的CaCO3/KALA/DNA纳米粒子。纳米粒子的尺寸和zeta电位用粒径电位仪测量。CaCO3/KALA/DNA纳米粒子的粒径随着KALA多肽的增加而增大,而由于KAKA多肽带正电使得纳米粒子的zeta电位随着KALA多肽增加而升高。由于KALA的存在,CaCO3/KALA/DNA纳米粒子的基因转染效率在HeLa和293T细胞中显著提高。细胞吞噬实验结果表明KALA多肽修饰能明显增加纳米粒子的摄入率。为了考察该体系基因与药物共传递性能,利用共沉淀技术,将抗肿瘤药物盐酸阿霉素和治疗基因p53高效地包封在CaCO3/KALA/DNA/DOX纳米粒子中。CaCO3/KALA/DNA/DOX纳米粒子体外细胞抑制效果由MTT法测定。实验结果显示,该纳米粒子对HeLa细胞生长抑制率超过80%,表明该纳米粒子能够有效的将基因与药物传递到细胞中。和未经修饰的CaCO3/DNA/DOX纳米粒子相比,CaCO3/KALA/DNA/DOX纳米粒子由于细胞摄入率较高而具有较高的传递效率。第五章的研究内容为磷酸钙/碳酸钙复合基因传递体系。为了有效控制粒径、提高体系稳定性,将磷酸钙和碳酸钙这两种组份同时引入共沉淀体系,形成CaCO3/CaP/DNA纳米粒子。与单组份体系(CaCO3/DNA、CaP/DNA)相比,当复合体系中碳酸根离子与磷酸根离子比例合适时,CaCO3/CaP/DNA纳米粒子的粒径较小、稳定性提高。用pGL3-Luc作为报告基因,测试了各种纳米粒子在HeLa和293T细胞中介导基因转染的能力,结果表明较之单组份体系,CaCO3/CaP/DNA纳米粒子介导基因转染的能力显著提高。细胞吞噬实验结果表明CaCO3/CaP/DNA纳米粒子的细胞摄入率与单组份体系相比有明显提高。
其他文献
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
当前社会提倡节能减排和高效发展,笔者结合多年高等院校后勤管理经验,系统梳理高校后勤水电管理现存问题,如忽视水电管理节约意识淡薄、管理制度不健全、设备陈旧耗能高且易
“城中村”属于以街区巷道、道路河流自然地域划分出的地缘型社区。是指任城市化进程中,在确定的城市建设发展预留地范围内,或因国家建设多年来人量征用土地后仅剩下少量农用地
基于交叉极化(CP)和交叉去极化(CDP)之间互易关系的定量交叉极化(QCP)核磁共振(NMR)方法能够直接测定CP增强因子,利用增强因子对普通交叉极化/魔角旋转(CP/MAS) NMR谱进行校
本论文以席夫碱为辅助配体,合成了35个稀土配合物,并对其中32个稀土配合物进行了晶体结构表征。研究了配体结构和中心金属对双-席夫碱稀土单胺化物与席夫碱稳定的二价稀土配
长期以来,学校体育处于教育环节的边缘地带,公众对于学校体育工作的漠视导致政策舆情面临着重大挑战。学校体育政策的传播是一个重要的环节,公众的认同决定了政策实施的效果。为
旅客列车塞拉门的检修一直是车辆维护工作中的重点,简易且行之有效的解决方法更有利于塞拉门的维护。为方便维修人员现场检修同时解决当前塞拉门故障快速诊断的缺乏,研制一套
本文通过阅读大量相关文献,结合实际工作经验,从国有建设用地收回标准、收回方式的确定以及收回流程规范等方面探索国有建设用地使用权收回补偿方式实施途径研究并经过实际案
在雾霾天气中获取的图像由于大气散射作用存在能见度和对比度降低、颜色偏移和失真等退化现象,严重影响了人眼和计算机视觉对图像信息的辨识和分析,直接限制了室外视觉系统应
面对全球的资源和能源危机,世界掀起了全球范围的生物质技术研究热潮,生物质资源因其可再生性和环保性而倍受到人们的重视。而竹子是一种优良的生物质资源,其纤维质量优良,是