大肠杆菌核心型血清学检测方法的建立和致病性大肠杆菌脂多糖核心型的分布

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建立了E.coli核心型血清学检测法(ELISA间接法),即用E.coli脂多糖核心型特异抗血清对E.coli核心型进行检测的方法.核心型特异性抗血清是用粗糙型(R)E.coli突变侏抗原制剂免疫家兔制备的.吸收前核心特异性抗血清与不同核心型抗原存在广泛交叉反应,吸收后抗血清获得单一核心型抗原特异性.对核心型特异性抗血清识别结合的成分进行检测.结果发现:(1)E.coli抗原制剂经核酸、蛋白酶处理后与相应核心型特异性抗血清的高反应性不受影响;(2)经高碘酸处理后与相应核心型特性抗血清的反应性极度降低;(3)用r-BPI和克隆-20对细菌脂多糖类脂A和内核心kdo-庚糖封闭后,不影响吸收后核心型特异性抗血清对相应E.coli抗原制剂的高反应性.上述检测结果表明,吸收后核心型特异性抗血清识别结合的抗原成分不是核酸和蛋白,也不是脂多糖类脂A和内核心kdo-庚糖,而是构成E.coli核心型的外核心已糖抗原.用新建核心型血清学检测法对四类30株不同血清型致病性大肠杆菌脂多糖核心型进行检测.结果发现:R1核心型15株占50%,R3核心型10株占33%,K12核心型5株占16.7%.其中8株不同血清型产毒性E.coli和1株肠出血性E.coli(O157)脂多糖核心型均为R1核心型;8株不同血清肠侵袭性E.coli脂多糖核心型分布为R1核心型4株、R3核心型2株、K12核心型2株;13株不同血清型肠致病性E.coli脂多糖核心型分布为R1核心型2株、R3核心型8株、K12核心型3株.上述四类30株不同血清型致病性大肠杆菌中均未检测出R2和R4核心型,而在正常人粪便中分离的6株大肠杆菌中就发现R2核心型1株,R4核心型2株.这种差异在流行病学调查中具有一定意义,同时表明E.coli脂多糖核心型与其致病性之间可能存在某种相关关系.
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