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芝麻素酚(sesaminol)是一种重要的脂溶性芝麻木酚素,具有多种生理功能如强抗氧化性、抗癌作用等,有着非常广阔的应用前景。芝麻素酚可以通过酶水解芝麻素酚三糖苷(sesaminol triglucoside,STG)制备,而STG是芝麻粕中主要的水溶性木酚素化合物。因此,本课题首先优化STG的HPLC色谱分析方法,然后以芝麻粕为原料,采用醇水溶液提取、聚酰胺柱层析法纯化得到一定纯度的STG,并利用酶催化水解STG制备芝麻素酚,探索其最佳水解条件,为芝麻素酚的工业化生产提供理论基础。首先,通过LC-MS分析,证实所提目标物为STG(tR=24.71 min,m/z 855[M-H]-)。并优化STG的HPLC色谱分析方法,得最佳HPLC分析条件:Phenomenex(C18,4.6 mm×l50 mm,5μm)色谱柱;UV检测器,检测波长:290 nm;流动相:甲醇和水;洗脱条件:30%~60%甲醇线性梯度洗脱45 min;柱温:30℃;流速:1.0 m L/min;进样量:20μL。用柚皮素作为内标使STG含量的测定更加的简单。方法学验证实验表明,该方法在浓度为20~400μg/mL内线性关系良好,其平均回收率是96.80%~98.09%,RSD均控制在2.00%以下。其次,对芝麻粕理化性质进行测定分析,了解原料特性。并以预处理后的脱脂芝麻粕(DSC)为原料,以STG的含量(μg/g DSC)为指标,对比分析5种常用试剂(去离子水、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、甲醇)对STG提取含量的影响,选择乙醇水溶液作为提取试剂。通过考察各因素对STG提取含量的影响,得到STG的提取条件为:乙醇体积分数为75%、提取温度为25℃、料液比为1:20(g/m L)、提取时间10 h、提取次数2次。在此条件下,STG的提取含量为44.37 mg/100 g DSC。再次,利用聚酰胺柱层析法对STG粗品进行进一步的纯化,获得纯度为86.53%的STG产物,为后续研究奠定物质基础。最后,测定β-葡萄糖苷酶和纤维素酶的酶活分别为36 U/m L和77085 U/m L。采用LC-MS法监测水解过程的不同阶段STG及其水解产物的含量及种类的变化过程。结果表明,STG的水解产物主要有芝麻素酚二糖苷(SDG,tR=31.20 min,m/z[M-H]-693),芝麻素酚一糖苷(SMG,tR=38.23 min,m/z[M-H]-531)和芝麻素酚(sesaminol,tR=47.07min,m/z[M-H]-369)。并建立合理的酶催化体系,以芝麻素酚的产率为指标,采用正交实验探索β-葡萄糖苷酶和纤维素酶催化STG转化制备芝麻素酚的最佳工艺条件为:酶总量100μL,β-葡萄糖苷酶和纤维素酶比例10:90(v/v),酶水解时间28 h,底物浓度7mg/m L,pH 4.8,温度45℃。在此条件下,得到芝麻素酚的产率为48.91%。