我国水产养殖规模位居世界前列,随着高密度集约化养殖模式的不断发展,养殖过程中的病害发生日益频繁,其中以细菌引起的疾病最为严重。细菌性疾病的爆发不仅制约了水产养殖产业的发展,而且对人类健康也存在潜在威胁,因此建立和完善水产致病菌的早期诊断方法显得尤为重要。时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）因其具有高灵敏、低背景、易操作、无放射性污染等优势,已然成为最灵敏的生物检测技术之一,其应用领域涉及面广,值得深入研究和开发潜在的应用价值。鉴于TRFIA法的诸多优势,本课题组率先建立了一整套成熟的检测水产致病菌的新方法。本文旨在此基础上探索新的研究方法,研究的主要内容如下:（1）合成了双功能铕螯合物Eu（TTA）₃（5-NH₂-phen）（ETNP）,并对其荧光性能进行了测定,通过戊二醛交联剂将ETNP标记到抗嗜水气单胞菌B11抗体上,利用建立的直接固相TRFIA法检测嗜水气单胞菌B11,检测限为5×10⁶ cfu/m L。（2）设计合成了一种新型双功能铕螯合物Eu（TTA）₃（4,7-二氯磺基苯-1,10-菲啰啉）（ETBCP）,建立检测水产致病菌的新型铕螯合物直接固相TRFIA法,检测限可以达到1×10⁵ cfu/m L,灵敏度高、特异性好,也可用于实际样品的检测。（3）将稀土元素共发光效应引入到DELFIA体系中,建立共发光直接TRFIA法检测水产致病菌的新方法。惰性稀土离子Lu³⁺的引入,大大提高了方法的检测灵敏度,利用新建立的方法检测嗜水气单胞菌B11,检测限为1×10³ cfu/mL,比试剂盒直接检测法降低两个数量级。