长茎葡萄蕨藻与柳珊瑚中活性物质的分离纯化及其性质的研究

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柳珊瑚与长茎葡萄蕨藻是我国海洋资源中被报道鲜有应用的天然植物,据文献报道柳珊瑚与长茎葡萄蕨藻中都具有相应的活性物质,只是还没有完整的分离纯化体系,将其真正应用到工业生产中。本文主要研究了应用高速逆流色谱从柳珊瑚及长茎葡萄蕨藻中分离出活性物质,并对其抗氧化进行鉴定,从而为进一步实施海洋活性成分高通量筛选提供理论和实践上的依据,为新型抗氧化药物的实践应用提供了理论依据。本研究以南海海域的柳珊瑚为原料,经过超声波清洗仪清洗干燥后由微波辅助萃取提取其中的活性物质,提取工艺条件经过响应面优化为:料液比1:40(g·m L-1),微波功率300W,萃取温度41℃,乙醇浓度82%,萃取时间15 min,在此条件下,伪蕨素的提取率实际值为95.21%。之后应用高速逆流色谱对柳珊瑚粗提物实现分离纯化,所用的HSCCC溶剂体系为正己烷-甲醇-水(2:1:1,V/V),先以轻相为固定相,重相为流动相,正接正转进行分离,根据在线图谱收集馏分,质谱检测目标峰I分子量为480.27908,分子式为C26H40O8,经过NMR鉴定分离单体结构,确定分离单体为伪蕨素I。质谱检测目标峰II分子量为423..27372,分子式为C24H39O6,经过NMR鉴定分离单体结构,确定分离单体为伪蕨素II,将得到的伪蕨素纯品进行定量分析,最终得出柳珊瑚中伪蕨素I的含量为1.21mg·g-1,伪蕨素II的含量为1.02 mg·g-1。长茎葡萄蕨藻经过超声波清洗仪清洗干燥后由微波辅助萃取提取其中的活性物质-蕨藻红素,影响蕨藻红素提取率的参数条件经过RSD进行优化,最终确定微波提取最佳工艺条件为:得到长茎葡萄蕨藻中蕨藻红素的最佳提取条件为:料液比1:30(g·m L-1),微波功率200W,萃取温度45℃,乙醇浓度85%,萃取时间20 min,长茎葡萄蕨藻中的蕨藻红素的实际提取率为91.9%。应用高速逆流色谱对长茎葡萄蕨藻中活性物质实现了分离纯化,所用的HSCCC溶剂体系为正己烷-甲醇-水(2:1:1,V/V),先以轻相为固定相,重相为流动相,正接正转进行分离,根据在线图谱收集馏分;应用制备液相对长茎葡萄蕨藻中活性物质实现了分离纯化,液相条件(流动相甲醇-0.2%冰乙酸(80:20,V:V);检测器88232UV紫外检测器;检测波长315 nm;流速2.8 mL·min-1;柱温30℃;进样量20μL;)质谱检测目标峰分子量为398.13,经过NMR鉴定分离单体结构,确定分离单体为蕨藻红素。将得到的蕨藻红素纯品进行定量分析,最终得出长茎葡萄蕨藻中蕨藻红素的含量为0.91 mg·g-1
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