雌激素（E2）是由卵巢分泌的一种类固醇激素,其与动物下丘脑-垂体-卵巢轴（hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA）中雌激素受体（Estrogen receptors,ERs）结合,调节哺乳动物的发情和性行为,对动物的繁殖活动等发挥重要的调控作用。雌激素受体包括雌激素受体α（ERα）和雌激素受体β（ERβ）两种经典亚型。为阐明雌激素及其受体在高原甘加型藏羊（Ovis aries）发情周期生殖活动中的作用,本研究系统地对甘加型藏羊发情周期不同阶段血浆中E2的含量和下丘脑-垂体-卵巢轴组织中ERα和ERβmRNA、蛋白的表达与其免疫阳性细胞分布的动态变化规律进行了研究。试验选取了健康未孕且处于发情周期的甘加型藏羊32只,分为发情前期、发情期、发情后期及间情期4组。（1）运用酶联免疫吸附法测定并分析甘加型藏羊发情周期血浆中E2的含量及动态变化规律,（2）应用q RT-PCR和蛋白免疫印迹法分别对其发情周期下丘脑、垂体、卵巢组织中ERα和ERβmRNA及蛋白的表达进行定量检测分析,（3）采用免疫组织化学法结合计算机图像分析软件（Image pro-plus）分析ERα和ERβ免疫阳性细胞在其发情周期HPOA组织中的分布,结果如下:1.甘加型藏羊发情周期血浆中E2的含量呈脉冲式和波动式交替变化,发情期和发情后期主要以脉冲式变化为主,发情期血浆中E2含量最高,为76.44±1.65ng/mL,发情后期为73.95±1.10 ng/mL,间情期为58.09±0.83 ng/mL,发情前期为59.20±1.09 ng/mL,发情期和发情后期E2的含量显著高于发情前期和间情期（P<0.05）。2.甘加型藏羊发情周期各时期下丘脑、垂体、卵巢组织中均有ERα和ERβmRNA及其蛋白的表达,且表达量存在差异:在下丘脑组织中,ERαmRNA及其蛋白相对表达量在发情后期最高（P<0.05）,ERβmRNA与蛋白相对表达量在发情前期最高（P<0.05）;在垂体组织中ERαmRNA及其蛋白相对表达量发情期最高（P<0.05）,ERβmRNA与蛋白相对表达量发情前期最高（P<0.05）;在卵巢组织中ERαmRNA与蛋白相对表达量发情前期最高（P<0.05）,ERβmRNA与蛋白相对表达量在间情期达表达量最高（P<0.05）。3.甘加型藏羊发情周期ERα和ERβ免疫阳性细胞在HPOA组织中均有分布,且阳性细胞着色深浅不一。下丘脑中ERα和ERβ免疫阳性细胞主要分布在促垂体区,ERα主要表达在大神经元胞浆和神经胶质细胞胞核,且发情前期表达最强（P<0.05）,而ERβ在大神经元胞浆及轴突表达,发情前期阳性表达最强（P<0.05）;垂体组织中,ERα和ERβ免疫阳性细胞均分布在垂体远侧部和中间部,ERα主要在嗜酸性细胞胞核高表达,且发情后期最强（P<0.05）,而ERβ主要在嗜酸性细胞胞浆中高表达,发情前期最强（P<0.05）;卵巢组织中,ERα和ERβ免疫阳性细胞均分布在生长卵泡颗粒细胞层、卵泡膜和黄体中。它们都表达在颗粒细胞胞浆和胞核、卵泡内膜细胞胞浆及黄体细胞胞浆中,且ERα在发情前期最高（P<0.05）,ERβ在间情期表达最高（P<0.05）。综上所述,甘加型藏羊发情周期血浆中E2的含量呈脉冲式和波动式交替变化,且在发情期达到最大值,促进卵母细胞的发育与成熟。ERα和ERβmRNA、蛋白及其免疫阳性细胞在发情周期各时期HPOA组织中的表达与分布有显著的差异性,说明雌激素及其受体ERα和ERβ对甘加型藏羊的HPOA生殖生理活动有重要的调节作用。该研究结果为雌激素及其受体（ERα和ERβ）对HPOA生殖功能的调控研究提供了直接的实验依据,对认识雌激素及其受体ERα和ERβ与哺乳动物生殖活动调控具有重要意义。