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目的：构建Fas基因真核表达质粒Pbk-Fas并将其转导入舌鳞癌Tca8113细胞，不同浓度的顺铂作用于转染前后的Tca8113细胞。探讨Fas基因转染联合应用顺铂对舌鳞癌Tca8113细胞的杀伤作用，以期应用较低的顺铂浓度获得较大的细胞杀伤和凋亡诱导作用，减少大剂量药物应用带来的毒性，为临床口鳞癌Fas基因治疗提供实验依据。
方法：取对数生长期淋巴细胞，用RT-PCR反转录成Cdna扩增Fas基因全长，亚克隆到真核表达载体Pbk-CMV内，构建出重组真核表达质粒Pbk-Fas。脂质体法将Pbk-Fas转染Tca8113细胞。取已转导入构建好Fas基因真核表达质粒Pbk-Fas的舌鳞癌Tca8113细胞，将其分为未转染Fas基因组，转染Fas基因两组，每组1×105/ml各100μl。将2组细胞分别接种至96孔板，加入100μl顺铂，使其最终浓度分别为1，5，10，20，40μg/ml，用MTT法检测顺铂对转染前后Tca8113细胞的抑制率，流式细胞仪测定转染前后不同浓度顺铂诱导Tca8113细胞的凋亡。
结果：
1.Fas基因真核表达质粒Pbk-Fas成功构建，重组质粒Pbk-Fas经酶切和测序鉴定，表明均含有大小正确的Fas基因片段。
2.MTT法检测细胞抑制率的结果显示转染组 Tca8113细胞的增殖抑制作用随着铂浓度的升高而升高，分别为57.39％±0.27％，61.81％±0.28％，67.08％±0.25％，75.44％±.030％，78.33％±0.23％，未转染组Tca8113细胞分别为29.60％±0.27％，33.00％±.0.35％，37.88％±0.36％，41.43％±0.27％，47.15％±0.25％。与未转染组比较，差异有显著性（P<0.01），表明Fas基因转染能增加顺铂对舌鳞癌Tca8113细胞的增殖抑制率。
3.流式细胞仪检测的结果显示：未转染组的Tca8113细胞的凋亡率分别为7.3％±0.2％，11.2％±0.3％，12.3％±0.5％，13.4％±0.5％，14.6％±0.3％％；转染组的Tca8113细胞的凋亡率分别为11.4％±0.2％，25.2％±0.6％，31.3％±0.4％，37.4％±1.2％，38.6％±1.4％。对未转染组，顺铂加入对Tca8113细胞的诱导凋亡作用无统计学意义（P>0.05），终浓度为1，5，10，20μg/ml的顺铂诱导Tca8113诱导凋亡有统计学意义（P<0.01）。顺铂对转染后的Tca8113细胞有更明显的诱导凋亡作用。
结论：Fas基因片段被成功插入真核表达载体Pbk-Fas质粒的多克隆位点。顺铂能有效的抑制体外培养的Fas基因转染的舌鳞癌Tca8113细胞的生长，促进了转染细胞的凋亡。