杀鱼爱德华氏菌和鳗弧菌是海水养殖鱼类常见的两种病原菌,可感染多种经济鱼种罹患爱德华氏菌病和弧菌病。本课题选取实验室前期开发的杀鱼爱德华氏菌减毒活疫苗WED和鳗弧菌减毒活疫苗MVAV6203,将两种疫苗联合注射接种大菱鲆,通过考察接种效果分析联合免疫过程中两种疫苗的协同或抑制作用,并进一步探究免疫协同或抑制的作用机制。结果发现,两种疫苗联合接种较单独接种可显著提高大菱鲆对鳗弧菌的免疫保护效果,血清特异性抗体显著增加,与抗原识别和递呈相关的基因如TLR2、TLR5、TLR21、MHC Ⅰ和MHC Ⅱ等在转录水平表达量增加,证实两种疫苗联合免疫具有免疫协同效果。另外,本课题制备了水型和油型鳗弧菌灭活疫苗,分析了两种类型疫苗作为口服疫苗接种大菱鲆的免疫潜力。结果发现,以海藻酸钠浓度为3%(w/v)、疫苗浓度为2.5 OD600、乳化剂司盘-80添加量为0.2%、水油比为1:9、转速为2000 r/min时制备效果最佳,但使用该疫苗口服接种大菱鲆未获得良好免疫保护效果;选择食品级鱼油,以菌体浓度为5 OD600、油水比例为1:9、转速为4000 r/min、乳化剂加入量为3%(w/v)时制备效果最佳,临床数据显示,口服接种该疫苗可提高大菱鲆幼鱼抗病能力。综上所述,本课题对两种海水养殖鱼类减毒活疫苗联合免疫效果进行了评价并分析了联合免疫的协同作用机制,另一方面,开发了油型鳗弧菌灭活疫苗,为渔用疫苗的开发和评价提供了一定的数据参考。