目的肾盂输尿管连接部梗阻(Ureteropelvic junction obstruction,UPJO)是引起肾积水的一种常见的梗阻性疾病。手术可解除梗阻。在如何更好地鉴别哪些肾积水患者将从手术治疗中获益的问题上,临床上仍存在一些争议。本研究采用标签定量技术,联合液相色谱串联质谱对分肾功能(differential renal function,DRF)低于40%的单侧UPJO患儿的尿液中存在的相对于正常人尿液差异表达蛋白质进行鉴定和筛选,探索参与UPJO病理生理发展过程的尿源性标志物。方法1.留取DRF<40%的单侧UPJO患儿的膀胱尿、患侧肾盂尿以及正常儿童的清洁晨尿,依次分别定义为UPJO膀胱尿(BU)、UPJO肾盂尿(PU)以及正常对照尿(CON)。尿液蛋白通过液相色谱串联质谱进行质谱检测分析。质谱数据采用Proteome Discoverer 2.2软件在Swissprot Human数据库中进行数据库检索。2.对鉴定出的所有尿液蛋白进行生物信息学分析,包括GO注释、COG注释。对共同差异表达蛋白进行GO富集以及Pathway代谢通路注释等。3.对筛选出的有意义的共同差异蛋白,在独立样本的各组尿液中进行Western Blot验证。结果1.本研究共鉴定了1130个蛋白,6922条肽段。其中显著性差异蛋白质按照P值<0.05且倍数值上调≥1.3或下调≤0.769进行相应的筛选。在BU与CON的比较中,共81个显著性差异蛋白质,在PU与CON的比较中,共186个显著性差异蛋白质。两个比较组共同有的显著性差异蛋白质共50个。这50个差异蛋白的功能主要涉及到吞噬作用、运输、炎症反应、信号通路等生物过程。2.Western blot结果提示5个候选差异蛋白(AGP1;AGP2;Fetuin-A;PGDS和protein AMBP)在DRF<40%的单侧UPJO患儿的膀胱尿以及肾盂尿中均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义。结论1.本项研究利用TMT定量蛋白质组学技术在DRF<40%单侧UPJO患者的膀胱尿及患侧肾盂尿中筛查尿液生物标志物并建立了尿液差异蛋白质谱。2.5个候选差异蛋白(AGP1;AGP2;Fetuin-A;PGDS以及protein AMBP)可能作为UPJO的尿源性标志物。它们在UPJO的病理生理中参与的具体机制尚需进一步研究。