转Btcry1Ah基因抗虫玉米的遗传稳定性分析及农艺性状观察

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在前期工作中,将Bt cry1Ah基因转入玉米自交系综31中,选取其中一株对亚洲玉米螟有显著抗性的玉米植株,命名为HGK60。分别从DNA水平和转录翻译水平对HGK60事件的T4代和T5代植株进行遗传稳定性分析。通过PCR、Tail-PCR、Southern Blot分析表明外源基因整合到了玉米基因组中并可以稳定遗传给后代,且明确了外源基因是按单插入双拷贝的方式插入到玉米1号染色体上,分析得到了玉米插入序列的侧翼序列。通过RT-PCR、Western Blot、ELISA、试纸条分析表明外源基因可以在玉米的根、茎、叶等组织中正常高效表达。在室内和田间分别用亚洲玉米螟、棉铃虫和黏虫幼虫对HGK60玉米的杀虫效果进行检测。室内生物活性检测结果表明,取食HGK60玉米心叶的亚洲玉米螟幼虫在3天后死亡率达100%;HGK60玉米对棉铃虫幼虫有毒杀作用,玉米不同部位对棉铃虫幼虫的杀虫效果存在差异;与综31相比,取食HGK60玉米叶片一周后的黏虫幼虫体重增长明显受到抑制。田间生物活性检测结果表明,HGK60玉米对于亚洲玉米螟和棉铃虫有很强的杀虫活性,达到高抗级别,对于黏虫有一定的杀虫活性,为抗性级别。对HGK60与郑58自交系回交转育5代后的转基因玉米进行农艺性状分析。在无虫害情况下,与郑58相比,HGK60的株高、穗位高、穗粗、穗长等差异不显著;在人工模拟虫害爆发的的情况下,郑58的生长发育受到影响,千粒重和单株产量都显著低于HGK60。以上研究表明,HGK60转基因抗虫玉米在玉米的抗虫育种上有很好的应用前景。
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