木聚糖的高温酸降解与酶降解

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植物纤维原料是地球上贮量最丰富的可再生资源,但长期没有得到充分利用。本论文以自植物纤维原料中提取的木聚糖作为产酶的碳源,研究了木聚糖酶合成的影响因素,并且合成了低CMC酶活木聚糖酶。另外为了解决功能性低聚木糖产品生产中木聚糖利用率低的问题,本论文利用加人稀醋酸在高温下处理酶解渣,使其中木聚糖有效降解。 研究结果表明,碳源类型和浓度影响木聚糖酶的活力和产率。利用农林废弃物自制粗木聚糖和酶解渣产酶,木聚糖酶活分别可达81.25IU/ml和53.16IU/ml。以自制粗木聚糖为碳源,较适宜的碳源浓度为10g/L左右,此时木聚糖酶得率达到最大值(15184IU/g木聚糖)。混合氮源产酶普遍好于单一氮源,其中硫酸铵、尿素和蛋白胨以一定比例混合产酶,木聚糖酶活可达173.52IU/ml。另外碳氮比是影响木聚糖酶合成的重要因素,当C/N达到7.0~8.0时,能有效抑制纤维素酶的产生。 以自制粗木聚糖为碳源,氮源为硫酸铵、尿素和蛋白胨混合,维持C/N在7.0,通过对培养条件的综合调控,提高初始pH值为6.0,采用变温培养(35℃~36℃/25℃~26℃)可以选择性合成低(无)纤维素酶活的木聚糖酶(木聚糖酶活和CHC酶活最大比值为1314)。 酶解渣高温处理时,加入醋酸可以有效促进木聚糖的降解,提高低聚木糖得率。较为适宜的酶解渣高温酸降解条件如下:处理温度为170℃,处理时间为30min,醋酸浓度为0.3%~0.5%。糖浓为67.4g/L的酶解渣经此条件处理后,平均聚合度下降,在1.80~1.62之间变化,低聚木糖得率可达36.2%~38.1%,高于不加酸时26.6%的得率,木聚糖残留率为53.9%~52.8%,低于不加酸时木聚糖残留率62.2%,木聚糖损失率为9.9%~9.1%,同样也低于不加酸时10.6%的损失率。同时由HPLC图谱分析看出,此时上清液中木聚糖有很大程度降解,总低聚糖得率约为40%,聚合度2~6的各种低聚糖得率较为平均,与木糖含量也大致相近,均为8%左右,成分分布较为合理。 经最佳条件高温酸降解的酶解渣再次酶解后,平均聚合度进一步降低为1.3左右,由HPLC图谱看出,上清液中聚合度较高的木聚糖含量减少,聚合度在10左右的木聚糖几乎全部被酶解,同时聚合度在2~6的低聚糖含量,也由酶解前的30.5%~37.5%降低为26.6%~29.9%,并且低聚糖种类减少,主要为木二糖和木三糖,而木糖含量却由酶解前的8.2%~9.6%显著增加到28.2%~36.1%。 由试验结果可看出,高温酸降解不仅使酶解渣中的木聚糖有效降解,有利于提高低聚木糖得率,同时其空间结构发生改变而有利于酶进攻,通过再次酶解可以使原来不能被酶降解的高聚糖成分,继续降解。从而为低聚木糖工业中进一步提高产率,降低生产成本提供依据。
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