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本课题研究了岩藻甾醇对人早幼粒白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡作用,并初步探讨了它的作用机制和途径。MTT实验结果表明,岩藻甾醇对HL-60细胞的生长有抑制作用,并呈剂量依赖性,各剂量组的OD值与空白对照组比较均具有显著差异(P<0.01)。岩藻甾醇对HL-60细胞的IC50=34.40μmol-L-1。采用Hoechst33258染色,荧光倒置显微镜下观察岩藻甾醇作用后细胞形态变化。结果表明,空白对照组细胞界限清晰,细胞核呈现弥散均匀荧光；岩藻甾醇作用于HL-60细胞48h后,细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒状荧光,随着给药浓度的增加,细胞出现凋亡小体并且逐渐增多。采用PI单染,在流式细胞仪下检测细胞周期分布和细胞的凋亡率。结果表明,岩藻甾醇作用于HL-60细胞24h后,细胞的凋亡率随着给药浓度的升高而增多,呈一定的剂量依赖性,浓度17.20μmol·L-1组凋亡率为15.64%,34.40μmol·L-1组凋亡率为16.80%,68.80μmol·L-1组凋亡率为17.15%,阳性药组凋亡率为22.04%。Go/G1期和S期细胞比例降低,G2/M期细胞比例升高,并呈二定的剂量依赖性,表明岩藻甾醇使HL-60细胞周期阻滞于G2/M期。在以上实验基础上,我们考察了岩藻甾醇诱导HL-60细胞凋亡的途径。应用激光共聚焦扫描显微镜检测了岩藻甾醇作用24h后的HL-60细胞中Fas和FasL蛋白表达量。结果表明,岩藻甾醇作用24h后,Fas、FasL蛋白的表达量均有所升高,并呈一定的剂量依赖关系。实验结果提示岩藻甾醇有可能通过死亡受体途径中的Fas/FasL途径诱导细胞凋亡。进一步应用激光共聚焦扫描显微镜法检测了岩藻甾醇作用后HL-60细胞中死亡受体相关蛋白Fadd,Caspase-8的表达量。结果表明,岩藻甾醇作用24h后,Fadd, Caspase-8蛋白的表达量均有所升高,并呈一定的剂量关系。在以上实验的基础上,还考察了与死亡受体途径相关的Caspase家族蛋白Caspase-8,Caspase-3的活性变化。用比色法检测凋亡相关酶的活性变化,结果表明,岩藻甾醇作用于HL-60细胞24h后,Caspase-8,Caspase-3的活性有显著变化,随着给药浓度的增加,活性不断增强,与阴性组对照具有统计学意义(P<0.01)。综上所述,岩藻甾醇具有体外抗肿瘤作用,并能诱导HL-60细胞凋亡。其作用机制可能是通过加强HL-60细胞死亡受体蛋白Fas,FasL的表达及死亡受体相关蛋白Fadd以及Caspase-8的表达；死亡受体蛋白Fas与FasL结合,再与死亡结构域蛋白Fadd结合,活化pro-Caspase-8,形成诱导死亡信号复合物,激活下游的效应Caspase-3,使细胞通过死亡受体途径凋亡。