【摘 要】
：
背景:甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）的高表达是导致胶质瘤对替莫唑胺产生耐药的重要原因。近些年来有研究表明Wnt/β-catenin和NF-κB通路与MGMT介导的替莫唑胺耐药相关。生酮饮食在实验和临床研究中表现出较强的抗胶质瘤作用,但是其对于胶质瘤治疗过程中增强替莫唑胺疗效的研究相对较少。生酮饮食可以调控NF-κB和Akt通路,但是其对于MGMT影响的相关研究较少。目的:探究生酮微环境对
论文部分内容阅读
背景:甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）的高表达是导致胶质瘤对替莫唑胺产生耐药的重要原因。近些年来有研究表明Wnt/β-catenin和NF-κB通路与MGMT介导的替莫唑胺耐药相关。生酮饮食在实验和临床研究中表现出较强的抗胶质瘤作用,但是其对于胶质瘤治疗过程中增强替莫唑胺疗效的研究相对较少。生酮饮食可以调控NF-κB和Akt通路,但是其对于MGMT影响的相关研究较少。目的:探究生酮微环境对胶质瘤细胞活力的影响,在此基础上进一步探究生酮微环境下及胶质瘤细胞对替莫唑胺耐药性的变化及潜在机制。方法:通过CCK8法检测高糖和低糖环境中不同浓度的β-羟基丁酸（BHB）对胶质瘤细胞和人脐静脉内皮细胞（HUEVCs）活力的影响;用CCK8法和细胞克隆形成实验检测生酮微环境对胶质瘤细胞活力的影响;通过PI/RNase和Annexin V-FITC/PI双重染色法染色检测生酮微环境对胶质瘤细胞的周期分布和凋亡比例的影响;用免疫蛋白印迹法（WB）检测生酮微环境对细胞周期相关蛋白及凋亡相关蛋白的影响;通过CCK8法和细胞克隆形成实验检测替莫唑胺联合生酮微环境对比替莫唑胺单药对细胞活力的影响;用Annexin V-FITC/PI和JC10试剂盒检测联合用药时胶质瘤细胞的凋亡比例和线粒体膜电位的变化;通过WB检测胶质瘤替莫唑胺耐药相关通路关键蛋白分子的表达水平变化。用细胞划痕实验及WB探究联合用药相对替莫唑胺单药治疗胶质瘤细胞的迁移能力变化。结果:1、高浓度BHB在低糖环境和高糖环境下均抑制了胶质瘤细胞活力。高糖环境下低浓度BHB对胶质瘤细胞的活力无显著影响,低糖环境下低浓度BHB轻微促进了胶质瘤细胞LN18和T98G的活力,对胶质瘤细胞A172和U118无显著影响。相同BHB浓度下低糖环境较高糖环境显著抑制了胶质瘤细胞的活力。HUVECs细胞被用于评价生酮微环境对正常细胞的影响,相当于高糖环境,其细胞活力在低糖环境未受到明显抑制。2、CCK8法和细胞克隆形成实验证明生酮微环境抑制了胶质瘤细胞的活力。生酮微环境导致胶质瘤细胞阻滞在G0/G1期,G1期相关蛋白Cyclin D1、CDK4和CDK6表达量显著下降;生酮微环境可诱导胶质瘤细胞凋亡,且胶质瘤细胞凋亡率和凋亡相关蛋白cleaved PARP-1和cleaved Caspase-3随着处理时间的延长而升高;生酮微环境对HUVECs细胞凋亡比例无显著影响。3、CCK8法和细胞克隆形成实验证明生酮微环境联合替莫唑胺增强了替莫唑胺对胶质瘤细胞活力的抑制,替莫唑胺IC50值在各细胞系均出现显著下降。联合用药时胶质瘤细胞的凋亡率较替莫唑胺单药治疗显著提升,线粒体膜电位显著下降,凋亡相关蛋白cleaved PARP-1、cleaved Caspase-3、Bax/Bcl-2表达量显著上调。4、替莫唑胺单药治疗上调了胶质瘤细胞MGMT蛋白的表达,磷酸化Akt、磷酸化GSk3β、β-catenin和磷酸化p65蛋白的表达也被提高。生酮微环境联合替莫唑胺给药抑制了胶质瘤细胞MGMT蛋白的表达,磷酸化Akt、磷酸化GSk3β、β-catenin、磷酸化p65蛋白及Bcl-2的表达也得到了下调。5、生酮微环境联合替莫唑胺显著抑制了胶质瘤细胞迁移能力,WB结果显示联合用药较单药治疗MMP9和Vimentin蛋白表达量得到了进一步下调。结论:1、生酮微环境抑制了胶质瘤细胞的活力,而对人脐静脉内皮细胞活力无明显抑制。生酮微环境诱导胶质瘤细胞G0/G1期细胞周期阻滞;生酮微环境诱导了胶质瘤细胞的凋亡,且呈时间依赖性,而对人脐静脉内皮细胞无显著促凋亡作用。2、生酮微环境联合替莫唑胺增强了替莫唑胺对胶质瘤细胞活力的抑制,促进了替莫唑胺对胶质瘤细胞凋亡的诱导,且进一步减弱了胶质瘤细胞的迁移能力。3、胶质瘤对替莫唑胺的耐药可能与激活的Wnt/β-catenin通路和NF-κB通路有关,生酮微环境可能通过抑制Wnt/β-catenin通路和NF-κB通路以及下游的MGMT蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,改善了胶质瘤对替莫唑胺的耐药性。
其他文献
目的:探讨颅咽管瘤不同手术入路的特点,复发因素对于手术全切率的影响以及颅咽管瘤的最佳治疗方案。方法:本研究中,笔者收集了吉林大学第一医院神经肿瘤外科2016.01.01-2020.12.31进行手术治疗,并且术后病理结果为颅咽管瘤的144例患者的资料。根据临床分型及肿瘤的生长方式分别采取了不同的手术入路进行手术治疗,对于手术中未能全切的患者,围手术期过后建议患者行立体定向放射治疗（伽马刀）,并对以
背景:现代颅内动脉瘤的显微夹闭治疗日趋完善,动脉瘤夹也在神经外科临床实践中更新换代,新一代开窗型动脉瘤夹—Yasargil T-Bar夹,在治疗某些复杂型动脉瘤时体现了其独特的优势,同时也为神经外科医生进一步探讨、研究复杂动脉瘤提供了方向。目的:研究Yasargil T-Bar夹在颅内动脉瘤夹闭术中的实效性、外科技巧及临床经验。资料和方法:回顾性分析了吉林大学第一医院神经外科2018年1月至201
目的:探讨合并急性肾损伤（Acute kidney injury,AKI）的尸体供者（deceased donor,DD）供肾用于移植的临床应用效果。方法:回顾性分析吉林大学第一医院泌尿外二科2015年1月至2020年1月间收治的390例尸体供者和763例受者的临床资料,根据供者AKI发生情况,将受者分为AKI组和非AKI组;按照KDIGO诊断分级标准,将AKI组分为KDIGO 1级组和KDIGO
我国证券市场起步较晚,在对会计信息披露违规的监管方面还是存在着许多不足,给一些有不好动机的管理人员留下了信息披露违规的漏洞,上市公司的会计信息违规披露行为使中小股东的投资方向直接受到影响,经济利益受到损害,此外证券市场的秩序也会受到一定程度的扰乱,阻碍资本市场的正常发展。伴随着市场经济的发展和资本市场的繁荣,虽然我国相关部门也在不断加大监管力度,然而会计信息披露违规的现象依旧存在,上市公司会计信息
当前国内大多数城市公立医院都已实现了信息化建设，信息技术在医院管理中的广泛应用和现代医院管理科学的飞速发展，医院信息化管理的重要性已得到社会的普遍认同。医院内外环境均需要信息支持，数据互联互通信息共享。信息化和大数据互联互通在医院经济运行中的应用和管理尤为突现。财务管理为医院的重要工作，管理能力高低同医院良性发展直接相关。基于大数据技术，
背景:胼胝体是处于人类大脑中线位置的重要的白质结构,其功能为在人类进行活动时协调双侧大脑半球的运作,胼胝体的联合纤维在大脑半球中占据着重要的地位。胼胝体肿瘤在临床上最常见的是胶质瘤,其余类型的肿瘤有淋巴瘤、脂肪瘤等。胼胝体膝部及体部最常见于肿瘤生长,而临床上较少遇见胼胝体压部肿瘤。通常认为胼胝体功能重要,部位较深,手术难度较大,因此,对此处肿瘤行手术治疗被风险是大于收益的。然而伴随影像学技术的提高
推进课程改革几年来,我们结合实际,对临川传统教育文化的继承与发展进行了深入的研究,我们确定推进课改的总体思路是:按照"弘扬临川文化,谋划和谐发展,成就幸福人生"的教育发展理念,确定"一个中心"—以实施素质教育为中心;强调"两个统筹"——城区学校与农村学校的统筹发
随着计算机技术的不断发展,人类社会中的各个方面开始与之产生紧密联系。人们日常生产生活中产生的海量数据大多以电子化的形式存储在关系型数据库中,在对这些数据进行访问时,往往需要编写SQL（Structured Query Language）来对数据库进行操作。但是,SQL本质上是一种计算机编程语言,编写SQL需要一定的专业知识,此外,还需要了解所访问的数据库模式。通过自然语言来与数据库进行交互查询数据
目的:探讨硬腭粘骨膜、掌长肌腱、鼻唇沟皮瓣这一“三明治结构”在全下睑再造中的可行性。方法:收集2015年至2020年于吉林大学第一医院治疗的因外伤或肿瘤切除导致重度下睑全层缺损行全下睑再造的13例患者的临床资料,对其进行回顾性分析,年龄范围23～61岁,平均年龄为42.2岁,10例为男性（71%）,3例为女性（29%）,病变部位:左下睑7例,右下睑6例,所有均累及眼睑全层,修复下睑缺损的面积为3c
血栓性疾病,如中风和缺血性心脏病,依然是全球死亡率及致残率最高的疾病。血栓的形成是一个复杂的、动态的、多步骤过程,涉及到生物化学反应、力学刺激、血流动力学等多个方面。近年来,人们已经从这些方面出发做了大量的研究,以期全面地理解血栓的形成机理,更好地预防及治疗此类疾病。然而,无论是从实验、数值还是理论角度,这都存在着巨大的挑战。实验上,受体内测量精确性限制,观察结果的可靠性往往难以保证;数值上,受血