贾第鞭毛虫是一种普遍存在的肠道寄生原虫,可感染世界各地的家畜和野生动物包括人类,引起人和动物的腹痛和腹泻。本论文首次对广东犬粪中发现的贾第虫包囊进行了形态学观察和分子鉴定,并建立了相应的巢式PCR检测方法。　　 首先对广东犬源蓝氏贾第虫进行分离和形态学鉴定,采用饱和硫酸锌漂浮法分离犬粪中的贾第虫包囊,通过显微镜观察发现,该贾第虫包囊呈椭圆形,大小约为12×7μm,碘液染色后呈黄绿色。结果显示该虫形态特征与以前报道的蓝氏贾第虫形态特征一致。　　 为了进一步明确该犬源蓝氏贾第虫的基因型,对分离的包囊进行基因组DNA抽提,设计引物对16SF/16SR、巢式引物GDHeF和GDHiF/GDHiR,分别用于扩增贾第虫小亚基核糖体RNA(16S rRNA)基因和谷氨酸脱氢酶(gdh)基因,将扩增产物进行克隆、序列测定和分析。将扩增序列与GenBank上登录的参考序列比对,并用DNAStar软件建立遗传关系树,以确定贾第虫的基因型。结果表明PCR扩增产物经1％凝胶电泳检测,分别出现299bp和432bp大小的片段,与预期结果一致;16S rRNA基因的序列分析结果显示该犬源蓝氏贾第虫的基因型为A型,对gdh基因序列的进一步分析显示该基因型为A1亚型,属于人兽共患的基因型。　　 本研究根据试验中测得的犬源蓝氏贾第虫16S rRNA基因序列,设计一对特异性引物对16SR3/16SF4,以含犬源蓝氏贾第虫16S rRNA基因片段的重组质粒作为标准模板,建立犬源蓝氏贾第虫的巢式PCR检测方法。结果表明:该PCR检测方法特异性强,能特异的扩增出犬源蓝氏贾第虫基因组DNA片段;敏感性高,对阳性参照DNA的最低检测量为0.95fg,比常规PCR提高了100倍。　　 用该检测方法对82份犬粪样品进行了临床检测,并与常规检测方法进行对比。结果表明:检测的82份临床样品中5份为阳性,比常规方法多出2份,这表明该方法比传统方法具有更高的敏感性和准确性。该检测方法的成功建立为犬源蓝氏贾第虫的流行病学调查和分子检测提供了有力的技术支持。