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苯并[a]芘(Benzo(a)pyrene, B[a]P)和菲(Phenanthrene, Phe)是具有典型“三致”效应的持久性多环芳烃类有机污染物，在土壤中逐步累积，对土壤环境造成潜在的威胁。B[a]P和Phe一次污染条件下，其进入土壤的过程与低剂量逐步累积的污染过程存在一定的差异，会在一定程度上高估B[a]P和Phe的环境风险。本试验采用多次叠加污染和一次污染两种方式，模拟污染物在土壤中逐步累积的过程，研究土壤B[a]P和Phe多次叠加污染的有效性特征及其对蚯蚓体腔细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、过氧化物酶(Peroxidase, POD)活性和丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量的毒性效应。研究结果表明： (1)随着B[a]P和Phe在土壤中培养时间的延长，土壤B[a]P和Phe的有效性（土壤B[a]P和Phe可提取含量、有效含量和蚯蚓富集量）及其对蚯蚓的毒性效应（SOD、POD酶活性和MDA含量）均呈前期（1~28 d）下降较快，后期（28~56 d）下降速率逐渐减缓的趋势。 (2)土壤B[a]P和Phe有效含量(Tenax法)比分别比土壤B[a]P和Phe可提取含量(ASE法)低37.36％~79.59%和79.72%~89.76%(p＜0.05)；并且蚯蚓B[a]P、Phe富集量与土壤B[a]P、Phe有效含量(Tenax吸附提取量)之间呈极显著正相关(P<0.01)，相关系数(R2)为0.927和0.9358。 (3) B[a]P多次叠加污染条件下，土壤B[a]P有效含量和蚯蚓富集量分别比一次污染低17.05%~38.60%和22.62%~46.81%(p<0.05)；蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和 MDA含量分别比一次污染低17.34%~50.38%、2.42%~24.48%和1.94%~16.97%(p<0.05)。B[a]P多次叠加污染对蚯蚓的毒性效应低于一次污染。 蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和MDA含量与土壤B[a]P有效含量的相关系数(R2)分别为0.6957(SOD)、0.7875(POD)和0.8728(MDA)，与蚯蚓B[a]P富集量的相关系数(R2)分别为0.6807(SOD)、0.7271(POD)和0.8290(MDA)； (4) Phe多次叠加污染条件下，土壤Phe有效含量和蚯蚓Phe富集量分别比一次污染低23.19%~50.15%和12.64%~57.89%(p<0.05)；蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和 MDA含量分别比一次污染低3.40%~47.24%、6.49%~38.02%和21.30%~57.82%(p<0.05)。Phe多次叠加污染对蚯蚓的毒性效应低于一次污染。 蚯蚓体腔细胞SOD、POD酶活性和MDA含量与土壤Phe有效含量的相关系数(R2)分别为0.8934(SOD)、0.8709(POD)和0.9305(MDA)，与蚯蚓体内Phe富集量的相关系数(R2)分别为0.9898(SOD)、0.9571(POD)和0.9727(MDA)； 本研究结果可为土壤B[a]P和Phe多次叠加污染的毒性效应评价提供理论依据。