嫁接提高园林小菊耐盐性研究

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园林小菊是菊花中一个品种群,在园林景观以及花海营造中发挥着重要作用。土壤盐渍化的日益严重,限制了园林小菊的应用。嫁接可以提高植物的抗逆性,合适的砧穗组合是利用嫁接提高耐盐性成功的关键。因此,筛选出耐盐性强的砧木,研究嫁接提高菊花耐盐性的机制,对于利用这种技术提高园林小菊的耐盐性具有重要意义。本研究通过对5种蒿属植物耐盐性的评价,筛选出耐盐性较强的黄蒿作为砧木,以园林小菊‘钟山嫣红’作为接穗进行嫁接。给以120mmol·L-1的NaCl胁迫处理,比较‘钟山嫣红’嫁接苗、自根苗和自接苗的形态指标、生理指标、离子分布的变化,同时结合RNA-seq技术,分析盐胁迫下嫁接影响菊花耐盐性的分子机制。具体工作和主要结果如下:1.在1/2Hogland营养液培养条件下,添加0、80、120、160 mmol·L-1共4种浓度NaCl 对蒿属植物北艾(Artemisia vulgaris)、黄金艾蒿(Artemisia vulgaris Variegate)、红足蒿(Artemisia rubripes Nakai)、云南蒿(Artemisiayunnanensis)、黄蒿(Artemisia annua)幼苗进行盐胁迫,6天后,测量生理指标,并使用主成分分析与隶属函数法,对5种蒿属植物的耐盐性进行综合评价。发现5种蒿属植物的耐盐性由强到弱的排列顺序为:黄金艾蒿>北艾>黄花蒿>红足蒿>云南蒿,黄金艾蒿、北艾和黄蒿的综合评价值接近,耐盐性相对较强。2.对120 mm·L-1NaCl胁迫下的‘钟山嫣红’的自根苗、自根嫁接苗、黄蒿砧木嫁接苗的生理指标和叶片、茎段的Na+、K+离子含量进行测定。结果表明:(1)NaCl胁迫下,嫁接苗叶片受害比率低于‘钟山嫣红’的自根苗和自接苗;(2)NaCl胁迫下,嫁接苗的叶片相对含水量、丙二醛含量、脯氨酸含量均低于自接苗和自根苗,叶绿素含量、SOD、POD含量高于自接苗和自根苗;(3)NaCl胁迫下,嫁接苗中部、下部叶片和接口上部茎的Na+含量均低于自接苗和自根苗,接口下部茎的Na+含量高于自接苗和自根苗。说明以黄蒿作为砧木进行嫁接菊花后,砧木对Na+较高的富集能力降低了 Na+在嫁接接口上部的积累,同时,砧穗互作赋予了菊花嫁接苗更强的光合性能和抗氧化能力,从而提高了菊花‘钟山嫣红’的耐盐性。3.120 mmol·L-1NaCl胁迫8d时,对菊花‘钟山嫣红’的自根苗、自接苗和嫁接苗的叶片进行转录组测序。结果表明:转录组中一共获得133567个unigenes。盐胁迫下,自根苗、自接苗和嫁接苗中分别差异表达1533、378、269个基因,其中共同表达59个DEGs,分别有1294、131、100个基因特异性表达。通过GO功能富集和KEGG pathway分析,发现在盐胁迫下嫁接影响了菊花‘钟山嫣红’叶片基因的表达模式。从差异表达基因中筛选出提高菊花耐盐性的基因进行分析,结果表明,盐胁迫下,嫁接通过调控转录因子表达与激素信号转导,提高渗透调节蛋白和抗氧化酶基因的表达,抑制叶绿素的降解等途径,提高了菊花的耐盐性。从差异表达基因中随机选取15个基因进行荧光定量PCR验证,结果表明其表达模式与转录组测序结果一致。
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