辣椒耐低温材料的筛选与评价

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辣椒(Capsicum spp.)原产中南美洲,包含5个栽培种和22个野生种,最适生长温度介于25℃~28℃之间,低于15℃将会抑制其生长发育。辣椒作为世界性蔬菜作物和调味品,生产上的品种基本都是C.annuum,低温是限制辣椒生长和优质高产栽培的主要环境因子,对辣椒不同栽培种耐低温性材料的筛选有助于改进辣椒的遗传研究和品种选育;研究WRKY基因则有利于利用分子生物技术提高辣椒的耐低温性。本研究通过苗期冷害指数的综合评价,对鉴定出的耐冷材料‘A270’和冷敏材料‘A136’进行4℃低温胁迫处理,研究了 SOD,POD活性变化,Pro含量、H2O2含量、MDA含量变化和OFR产生速率;通过RT-PCR,研究了 4℃低温胁迫、盐胁迫处理下耐冷材料‘A270’和冷敏材料‘A136’的WRKY基因WRKY57,WRKY64的表达变化。主要研究结果如下:1.对分属辣椒5个栽培种共38份辣椒材料进行苗期耐低温鉴定。在38份试验材料中,低温处理 7d,C.pubescens种的 PI593617、PI593630、PI585270 和 C.annuumA270 无明显失水和水渍化等冷害症状,低温处理7d,C.annuumA136、C.annuumPI264281、C.chinensePI241668表现为叶片轻微失水,下垂,综合对比苗期7d、14 d、21d苗期冷害指数,鉴定获得了耐低温材料1份C.annuum‘A270’和低温敏感材料5份,包括C.annuumA136、PI264281 材料 2 份,C.chinensePI241668、Grif9238 材料 2 份,C.pubescensPI593632 材料 1 份。2.研究了两份耐冷性不同的材料在不同低温处理时间对辣椒叶片膜质过氧化及保护酶系统及脯氨酸的影响。耐冷材料‘A270’在低温处理0~24 h内SOD活性始终高于冷敏材料‘A136’;耐冷材料‘A270’POD活性在低温处理0~6 h内快速上升,显著高于冷敏材料;低温胁迫处理6~48 h,OFR产生速率和MDA含量冷敏材料‘A136’高于耐冷材料‘A270’;低温处理0~48 h内,耐冷材料‘A270’H2O2含量高于冷敏材料‘A136’;冷敏材料‘A136’脯氨酸含量在低温处理12~48 h内高于耐冷材料‘A270’。结果表明,耐冷材料‘A270’对低温应答的反应速度及氧自由基的清除能力强于冷敏材料‘A136’,耐冷材料‘A270’膜脂过氧化程度低于低于冷敏材料‘A136’。3.分析了低温胁迫、盐胁迫下WRKY基因的表达量差异。低温、盐胁迫均能诱导WRKY64基因的表达。耐冷材料‘A270’低温胁迫后,WRKY57基因虽然显著上调,但其表达量在3h和24 h耐冷材料低于冷敏材料且差异显著,是否受低温胁迫诱导还需进一步验证;低温胁迫6h时耐冷材料‘A270’WRKY64基因显著上调,6h和9h时,耐冷材料‘A270’表达量高于冷敏材料‘A136’,差异显著,24h相反。因此,WRKY64基因可能受到低温胁迫诱导表达。‘A136’盐胁迫后WRKY基因表达量始终较低,‘A270’在盐胁迫6h、9h、12h、24h时,WRKY64表达量高于‘A136’,在盐胁迫9h时表达量瞬时上调且差异显著,因此我们推测WRKY64可能受到盐胁迫诱导表达。
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