AtMAP65-1可能参与调节保卫细胞微管排列方式的实验依据

来源 :首都师范大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:yanglsm
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高等植物气孔保卫细胞作为公认的一种典型而又发达的信号转导体系,对干旱、低温等环境胁迫均能作出快速有效的反应。在全球生态环境破坏日趋严重的今天,气孔运动过程中的信号转导机制一直是众多科研工作者研究的热点。光、CO2、ABA、H2O2、NO、蛋白激酶、蛋白磷酸酶、细胞骨架等多种因素都能影响保卫细胞气孔运动。本文以植物微管结合蛋白AtMAP65-1为研究对象,从拟南芥总基因组中克隆获得编码微管结合蛋白AtMAP65-1的基因,构建35S驱动的AtMAP65-1-GFP融合基因植物表达载体,利用农杆菌浸染法转入拟南芥获得转基因植株。为了研究AtMAP65-1在保卫细胞中的定位及与细胞内微管的关系,为进一步研究AtMAP65-1在气孔运动中的作用打下基础,本实验用激光共聚焦显微镜观察转基因植株叶片中AtMAP65-1-GFP的分布情况发现:①在光诱导的开放气孔保卫细胞中AtMAP65-1-GFP成束并沿细胞腹壁向背壁呈有规则的辐射状分布;②用微管特异性抑制剂长春花碱处理叶片90min后,随着微管的解聚及气孔开度的减小,AtMAP65-1-GFP束也变成小片段。将处理时间延长至120min后,叶片中AtMAP65-1-GFP呈点状弥散在整个保卫细胞内;③黑暗处理的叶片保卫细胞中,AtMAP65-1-GFP也呈点状随机分布在保卫细胞中。以上实验结果表明:保卫细胞中的AtMAP65-1-GFP结合到微管上与微管共定位,并可能参与调节周质微管的排列方式,这有助于我们深入研究AtMAP65-1-GFP在气孔运动中的作用;进一步探讨微管骨架与其它调节气孔运动的信号通路因子之间的协同作用,完善气孔运动机理,可为植物对逆境的适应、水分的合理利用以及植物抗旱育种生理指标的规范化等提供可靠的理论依据。
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