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目的:对两面针Zanthoxylumnitidum(Roxb.)DC.药材进行甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌抑制作用的研究,为两面针药效学研究提供试验依据。建立两面针抑菌活性部位的HPLC指纹图谱,为科学评价和有效控制两面针的质量以及建立两面针规范化生产基地提供实验依据。对两面针药材进行甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌的“谱-效”研究,为中药谱效学的研究发展提供参考。 方法:(1)采用纸片琼脂扩散法进行两面针抑菌活性部位的筛选。(2)采用HPLC法建立两面针抑菌活性部位的HPLC指纹图谱,获得两面针药材量化的指纹特征。(3)采用纸片琼脂扩散法对两面针提取物进行抑菌活性研究,获取各样本量化的药效学数据。(4)在获得两面针药材量化指纹特征和量化药效学数据的基础上,进行统计分析,建立两面针药材对甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌的“谱-效”方程。(5)对两面针中的已知成分氯化两面针碱含量、乙氧基白屈菜红碱含量及二者含量在药材中比例的变化对三个菌种抑制活性变化的关系进行了初步的探讨。 结果:(1)HPLC指纹图谱标定了24个共有特征峰,33批次的两面针样本中,有21个样本的两面针相似度均大于0.9,5个样本的两面针相似度大于0.8而小于0.9,7个样本的两面针相似度均小于0.8。方法学考察结果表明,指纹图谱的精密度较高、24小时的稳定性较好、系统重现性良好,说明本法能有效控制两面针质量,为完善其质量评价标准提供依据,且用此法提取两面针量化指纹特征数据稳定、可靠。(2)两面针药材对甲型溶血性链球菌的“谱”-“效”方程为:Y=6.833-3.005X1-1.172X4+1.653X5-0.547X8+0.538X10+1.375X11-0.639X13-0.784X14+0.620X15-1.265X16+1.174X19+1.627X20+1.813X21+0.643X22+1.155X24(R2=0.952);两面针药材对乙型溶血性链球菌的“谱”-“效”方程为:Y=6.300-4.213X1+1.110X3-1.128X4+1.550X5-0.656X7-0.490X8+1.394X11-0.462X12-0.667X13-0.862X15-1.416X16+1.202X18+1.674X19+2.209X20+1.636X21+1.340X22+1.332X24(R2=0.922);两面针药材对肺炎链球菌的“谱”-“效”方程为:Y=5.870-2.982X1-1.836X4+2.410X5+1.136X6+1.199X11-0.537X13-0.369X14-0.764X16+2.111X19+0.439X20+1.670X21+1.406X22+0.227X23(R2=0.960)。三个方程的验证结果表明,采用本法建立的方程稳定、可靠,具有较好的预测性。(3)在氯化两面针碱含量、乙氧基白屈菜红碱含量及二者比例变化与两面针提取物抑菌活性变化关系的分析中发现:两面针提取物的抑菌活性并没有随着氯化两面针碱含量的增高而加强,却随着乙氧基白屈菜红碱含量的增高而有增强趋势;当氯化两面碱含量占乙氧基白屈菜红碱含量的百分比约在10%~35%时,两面针药材的抑菌活性最强。 结论:本课题进行了两面针抑菌活性的测定,并建立了两面针抑菌活性部位的HPLC指纹图谱,为控制两面针质量,建立规范化两面针药材生产基地提供了实验依据,也为两面针谱效学的研究提供实验基础;对两面针药材进行甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌的“谱-效”研究,为中药谱效学的研究发展提供参考;对两面针中的已知成分氯化两面针碱含量和乙氧基白屈菜红碱含量及二者比例变化与两面针抑菌活性变化的关系进行了初步的探讨,为两面针质量控制提供参考依据。