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传染性脾肾坏死病毒(InfectiousSpleenandKidneyNecrosisVirus，ISKNV)属于虹彩病毒科(Iridoviridae)，近年在广东地区流行，导致养殖鳜鱼大批死亡。通过对ISKNV的全基因组测序结果分析，推定基因组中001LORF表达产物为膜蛋白(P001L)，具有10-11个跨膜区。本实验通过PCR将001LORF的DNA序列从基因组中扩增出来后克隆到真核表达载体PEGFP-N3上，随后转染FHM细胞，通过荧光显微镜和共聚焦显微镜观察发现P001L除了表达于细胞膜上外，在细胞核附近的区域有较多的聚集，推测该位置是在内质网或高尔基体上。另外为了验证001LORF中预测潜在的信号锚定序列，分别将001LORF氨基酸序列中1-34和1-61个潜在的信号锚定序列以及35-378、62-378和缺失了35-61位氨基酸的剩余序列克隆到PEGFP-N3载体中，通过转染FHM(musclecelloffatheadminnow)细胞发现缺失了前61个氨基酸的001L蛋白以弥散的状态分布于细胞质中，这不仅确定了蛋白N端前61个氨基酸中具有信号锚定序列，它可以将P001L蛋白的合成由细胞质中转到内质网上，而且这61个氨基酸决定P001L能否插入到细胞膜上。转染的结果还证明1-34和35-61位的氨基酸组成了第一个和第二个跨膜区，并且其中任何一个片段都可以起到信号锚定序列的作用，同时我们还发现P001L的1-34和1-61个氨基酸接上GFP后形成的融合蛋白在细胞内可以形成空泡状结构。