哺乳动物的有性生殖过程包括生殖细胞（精子和卵子）发生、受精、着床和胚胎发育等环节,其中受精是最为重要的步骤。精子与卵子结合并融合形成受精卵是受精的中心环节,这一环节的分子机制尚不清楚。已发现精子膜蛋白IZUMO1与它在卵细胞膜上的受体蛋白JUNO识别是精卵粘附的先决条件之一,但仅仅有IZUMO1-JUNO相互作用还不足以导致细胞膜融合,应该有其他配子蛋白参与了精卵融合。本实验鉴定了Hedgehog信号的辅助受体CDON与JUNO和IZUMO1的相互作用,并测定了CDON对受精率的影响,评估CDON在精卵融合过程中发挥的作用。首先克隆大鼠cdon的cDNA编码区。将这一片段分别插入到pET-28a、pGAD-T7和pCMV-C-Flag质粒中构建pET-cdon原核表达载体、pGAD-cdon酵母表达载体和pCMV-Flag-cdon真核表达载体。将pET-cdon原核表达载体转化到大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达HISCDON融合蛋白,分离纯化融合蛋白免疫小鼠得到HIS-CDON腹水多克隆抗体。利用自制的抗体进行大鼠卵巢的免疫荧光染色实验,结果显示:CDON在大鼠卵巢组织中广泛存在,主要存在于卵细胞膜和周围的颗粒细胞中。对大鼠卵细胞和精子的免疫荧光共定位实验显示:CDON局部定位于MII期卵母细胞膜上,且与JUNO存在共定位,但在精子上不表达。使用自制的CDON抗体分别孵育大鼠的卵细胞和精子,使其受精并统计受精率。结果表明:精子和卵子经过抗体处理后受精率下降,但不显著。将pGAD-cdon酵母表达载体与实验室保存的pGBK-Juno和pGBKIzumo1进行酵母双杂交实验,结果显示CDON与JUNO和IZUMO1均存在相互作用。将构建好的pCMV-Flag-cdon真核表达载体与实验室保存的pCMV-HAJuno和pCMV-HA-Izumo1进行免疫共沉淀和Western blot分析。进一步说明CDON与JUNO和IZUMO1均存在相互作用。本实验发现CDON与JUNO和IZUMO1在体内外均具有相互作用,且在卵巢和卵母细胞膜上均有表达,提示CDON在精卵融合过程中发挥一定的作用。