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目的:口腔鳞状细胞癌（以下简称为口腔鳞癌）是头颈部最常见的恶性肿瘤之一。目前口腔鳞癌患者的治疗方式大多采用以外科手术为主,放疗、化疗等治疗方式为辅的综合序列治疗。尽管口腔鳞癌的治疗手段在逐渐的发展进步,其患者的五年生存率却在过去的数十年内未得到显著的提高。鉴于此,针对口腔鳞癌的早期诊断及靶向治疗相关的生物标志物的筛选对于口腔癌的治疗至关重要。TMEM16A是近年来发现的一种钙激活氯通道,是跨膜蛋白16家族中10位成员之一。TMEM16A存在于人体的许多正常组织中,参与调节许多重要的生理功能。TMEM16A表达异常以及功能改变可能导致包括癌症在内的许多疾病。越来越多的研究表明,TMEM16A在头颈鳞状细胞癌（以下简称为头颈鳞癌）中表达量明显升高,且其高表达与肿瘤的发生发展有密切的关系。口腔鳞癌为头颈鳞癌的重要组成部分之一,然而TMEM16A在口腔鳞癌中的表达及作用鲜有报道。辛伐他汀作为一种羟甲基戊二酰辅酶A（HMG-Co A）还原酶抑制剂,是临床上常用的降血脂药物。越来越多的研究证据表明,辛伐他汀具有一定的抗肿瘤作用。有报道称辛伐他汀可以通过甲羟戊酸（MVA）依赖机制和MVA非依赖机制抑制肿瘤细胞,但其抗肿瘤作用的分子机制目前尚无定论。本研究期望通过一系列的实验验证TMEM16A在口腔鳞癌中的表达和临床意义,研究TMEM16A对口腔鳞癌细胞增殖的影响,以及辛伐他汀对口腔鳞癌细胞增殖的影响及其作用机制。研究方法:通过对TCGA数据库中305例口腔鳞癌标本和30例癌旁组织标本的临床数据和TMEM16A m RNA表达数据进行生物信息学分析,对GEO数据库中40对口腔鳞癌标本和癌旁组织标本的TMEM16A m RNA表达数据进行生物信息学分析。对84例口腔鳞癌组织切片及12例正常口腔黏膜组织切片的免疫组织化学染色分析并结合患者的临床资料,来研究TMEM16A在口腔鳞癌组织与非癌组织中的表达差异及其与口腔鳞癌患者各项临床指标的关系。通过全细胞膜片钳技术验证TMEM16A在口腔鳞癌细胞CAL-33中是否介导钙激活氯电流。通过CCK-8实验分别研究敲低TMEM16A、TMEM16A抑制剂、过表达TMEM16A对口腔鳞癌细胞增殖的影响。通过全细胞膜片钳技术研究不同浓度的辛伐他汀对口腔鳞癌细胞CAL-33中TMEM16A通道功能的影响。通过Western blot实验研究辛伐他汀对CAL-33细胞中TMEM16A蛋白表达量的影响。通过CCK-8实验研究辛伐他汀对口腔鳞癌细胞CAL-27、CAL-33和人永生化表皮细胞Ha Ca T细胞增殖的影响。通过CCK-8实验研究不同浓度的辛伐他汀对CAL-33细胞增殖的影响以及加入过量MVA、敲低TMEM16A或过表达TMEM16A对辛伐他汀增殖抑制作用的影响。结果:数据库生物信息学分析结果表明,口腔鳞癌组织中TMEM16A m RNA的表达量显著高于癌旁组织。TMEM16A m RNA的表达量与口腔鳞癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期显著相关。T3与T4分期、N1-N3分期、临床分期Ⅲ期及Ⅳ期的口腔鳞癌患者中TMEM16A m RNA的表达量分别高于T1与T2分期、N0分期、临床分期Ⅰ期及Ⅱ期的口腔鳞癌患者。Kaplan-Meier生存分析结果表明,TMEM16A m RNA高表达的口腔鳞癌患者的总生存时间显著低于TMEM16A m RNA低表达的患者。免疫组织化学染色结果表明,口腔鳞癌组织中TMEM16A蛋白的表达量显著高于正常口腔黏膜组织。TMEM16A蛋白的表达量与口腔鳞癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期显著相关。T3与T4分期、N1-N3分期、临床分期Ⅲ期及Ⅳ期的口腔鳞癌患者中TMEM16A蛋白的表达量分别高于T1与T2分期、N0分期、临床分期Ⅰ期及Ⅱ期的口腔鳞癌患者。Kaplan-Meier生存分析结果表明,TMEM16A蛋白高表达的口腔鳞癌患者的总生存时间显著低于TMEM16A蛋白低表达的患者。TMEM16A在口腔鳞癌细胞CAL-33中介导钙激活氯电流。TMEM16A的敲低、TMEM16A的抑制剂T16Ainh-A01（20μM）可以显著抑制CAL-33细胞的增殖。TMEM16A过表达可以显著促进口腔鳞癌细胞CAL-27的增殖。辛伐他汀可以显著抑制CAL-33细胞中的钙激活氯电流,且抑制效果呈现剂量依赖性。辛伐他汀的IC50为5.605±1.512μM。此外,辛伐他汀（10μM）对CAL-33细胞中TMEM16A的蛋白表达水平没有显著的影响。辛伐他汀（10μM）可以显著的抑制口腔鳞癌细胞CAL-27和CAL-33的细胞增殖,对Ha Ca T细胞的增殖没有显著的影响。辛伐他汀（10μM）对CAL-33细胞增殖的抑制作用呈现剂量依赖性。加入过量的MVA（500μM）可以显著减少辛伐他汀对CAL-33细胞的增殖抑制作用。TMEM16A的敲低可以显著减少辛伐他汀对CAL-33细胞的增殖抑制作用。TMEM16A过表达可以显著的提高辛伐他汀对CAL-27细胞的增殖抑制作用。结论:TMEM16A在口腔鳞癌组织中表达量显著提高。TMEM16A的高表达与口腔鳞癌的肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、患者总生存时间减少显著相关。TMEM16A促进口腔鳞癌细胞的增殖。辛伐他汀能够通过抑制CAL-33细胞中TMEM16A的通道功能,进而抑制口腔鳞癌细胞的增殖。