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猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）能够引起妊娠母猪流产、死胎等繁殖障碍和仔猪呼吸系统疾病,称为猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS）。PRRSV具有噬单核/巨噬细胞特性,主要是通过受体介导的胞吞途径侵染宿主细胞。在PAM细胞中,HS介导PRRSV吸附、Sn介导PRRSV内吞、CD163介导PRRSV的脱衣壳和病毒基因组释放等。Marc-145细胞中不存在Sn和HS,已有研究发现非肌肉肌球蛋白II型重链A亚型（Non-muscle Myosin Heavy Chain II-A,NMHC II-A）和波形蛋白是PRRSV侵染Marc-145细胞的重要受体,在侵染过程中发挥重要功能。单颗粒示踪技术是一种能够实时原位地示踪生物事件动态过程的新兴技术,现已应用于多种病毒研究,通过对病毒粒子荧光标记并用显微镜实时原位监测病毒粒子侵染行为,推动病毒侵染机制研究进展。为了探索PRRSV在Marc-145细胞中的运动行为,解析波形蛋白和NMHC II-A在PRRSV侵染Marc-145细胞中的作用,深入研究PRRSV侵染机制,本文选用稳定性好、荧光信号强的量子点为荧光标记物,利用链霉亲和素和生物素的相互作用,量子点标记PRRSV,并通过电镜、TCID50、生长曲线和免疫荧光共定位等实验验证;用共聚焦显微镜长期、实时、原位示踪了PRRSV单个及群体行为;分别转染GFP和微管、微丝的融合表达载体,成功标记细胞骨架,并研究了其在病毒转运过程中的作用。为了深入探索和研究NMHC II-A和波形蛋白等细胞受体在PRRSV侵染Marc-145过程中的作用,本文通过分别构建波形蛋白和NMHC II-A与GFP的融合表达载体,并通过瞬时转染,实现Marc-145细胞中波形蛋白和NMHC II-A标记,利用病毒单颗粒示踪技术研究他们在病毒侵染过程中的作用。结果表明:（ⅰ）用量子点成功标记PRRSV,经验证,该标记方法对病毒粒子生物活性影响小,标记效率高;（ⅱ）在Marc-145细胞中,PRRSV通过慢-快-慢的间歇运动从细胞外围向细胞核周围运动,多数汇聚至特定区域;（ⅲ）PRRSV依赖于微管、微丝等细胞骨架转运至核周围,并多数聚集至一定区域;（ⅳ）部分病毒沿波形蛋白从细胞外围运动至核周,波形蛋白可能参与PRRSV的胞内转运;（ⅴ）NMHC II-A与PRRSV具有明显的共定位,可能与病毒的胞内转运有关。本文将单颗粒示踪技术应用于PRRSV侵染机制研究中,为PRRSV研究提供新技术,有助于推动PRRSV侵染机制研究进展。波形蛋白和NMHC II-A等PRRSV细胞受体研究,有利于揭示PRRSV侵染机制,为研制更有效的病毒疫苗和高效的诊断试剂奠定基础。