原子力显微术对生物分子间相互作用的研究

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原子力显微镜(Atomic Force Microscopy,缩写AFM)是通过探针与被测样品之间微弱的相互作用力来获得物质表面形貌的信息,自发明以来已被广泛应用于物理学、化学、生物学、纳米技术学等等领域.AFM一问世,就被迅速地应用在生物医学工作的前沿,它不仅可以对DNA、蛋白质进行形貌分析,还可进行直观下的分子剪辑、DNA特殊定位等高水准工作.该文主要内容及其结论如下:1)细胞贴壁对于研究细胞微阵列芯片和生物相容性材料具有十分重要的意义.胶原蛋白已经被证明有利于改善细胞贴壁环境,我们用两种不同的胶原蛋白修饰载体表面方法,一种方法是将胶原蛋白直接接枝于载体表面,另一种方法是将胶原蛋白接枝于1﹪壳聚糖处理过的载体表面.2)我们固定超螺旋质粒DNA分子和λ-DNA分子在3-aminopropyltriethoxysilane(APTES)修饰过的云母上,通过改变pH值来将它们的构象变为环状和拉直线状.该文不仅提供了在固相载面上对DNA分子构象的详细了解,而且还阐述了原子力显微镜(AFM)图像技术能作为一个强有力的工具来研究DNA分子在不同ph值云母上的构象变化.3)我们用原子力显微镜研究不同浓度的长春新碱和阿司匹林诱导DNA分子的结构变化.DNA分子同这两种药物作用的AFM图像显示,长春新碱作用于DNA分子会产生一些螺旋圈和不同大小的DNA片段,而阿司匹林作用于DNA分子会引起DNA链宽度变化和构型转化.这两种药物作用于DNA分子的不同结构变化可归结为它们同DNA分子的不同作用机制.该文的工作对小分子引起不同的DNA分子结构变化和构型转变提供了一种新颖的表征手段,进一步用实验方法说明原子力显微镜(AFM)作为一种图像分析技术在小分子同DNA大分子相互作用的研究中可发挥较大的作用和其它仪器设备无法比拟的直观、清晰的优势.4)我们用原子力显微镜(AFM)获取了EcoR1甲基化酶同DNA双链结合体的三维形貌图像,图像不仅提供了一个生物样品二维的信息,而且也有力地提供了三维的高度信息.我们表征了线型化的pBR322和EcoR1甲基化酶结合物,并证明两个EcoR1甲基化酶作为同型二聚体结合在DNA双链上,即一个EcoR1甲基化酶作为单聚体结合在DNA双链的一条单链上.该文的工作显示原子力显微镜(AFM)可在研究DNA和蛋白质相互关系方面发挥重要作用.
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