双微体是肿瘤及获得性耐药细胞中基因扩增的重要载体，经常携带癌基因和耐药基因，它的存在与肿瘤的发生、演进及预后密切相关。肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是造成化疗失败的主要原因，为进一步探讨耐药性的形成机制及双微体在肿瘤和耐药过程中所扮演的重要作用，本研究对甲氨蝶呤抗性的小鼠胚胎成纤维细胞中MTX的耐药机制进行了初步探讨。　　本研究首先采用array-CGH技术，阐明了MTX耐药NIH3T3细胞系中差异基因的全貌。利用生物信息学方法挖掘甲氨蝶呤抗性的小鼠胚胎成纤维细胞中与耐药相关的基因，初步探讨其功能及相应分子机制。随后整合分析array-CGH芯片、miRNA芯片和mRNA表达谱芯片数据，探寻其功能。实验结果，从基因表达谱芯片中筛选得到753个差异表达基因，其中357个上调，396个下调。其中21个表达上调和9个表达下调的基因与耐药相关，Mdm2、Cdkn2a、Krit1、Dhfr等与耐药相关的基因位于双微体上。结果提示，药物抗性小鼠中除了靶基因的扩增参与甲氨蝶呤耐药，DNA修复能力的改变、细胞解毒功能的增强等参与细胞耐药性的产生，此外作为基因扩增主要形式的双微体在耐药过程中同样发挥重要作用。