葛根总黄酮诱导急性髓细胞白血病细胞株HL-60细胞分化的实验研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengjuanjuan8288
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[背景与目的]葛根是南京中医药大学第一附属医院血液科原创制剂“血复康”的主要成分之一。课题组先期的研究已经证实葛根主要有效活性成分葛根总黄酮(Puerariae radix flavones, PRF)在50μg/ml-200μg/ml的浓度范围内对NB4. Kasumi-1、HL-60、U937四种急性白血病细胞株有选择性增殖抑制作用。对于HL-60细胞观察到较低浓度葛根总黄酮(50μg/ml)可能促进急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML细胞株HL-60细胞的增殖,较高浓度(200μtg/ml)葛根总黄酮则诱导HL-60细胞凋亡。本研究拟以<50μg/ml PRF处理HL-60细胞株,探讨该浓度的PRF对HL-60细胞可能的分化作用。[方法]1)10-100 ug/ml PRF处理HL-60细胞24、48及72小时,MTT法检测HL-60细胞的增殖抑制率,筛选PRF最佳工作浓度。2)10、30、50μg/ml PRF处理HL-60细胞48小时,瑞氏染色法观察细胞形态学改变,检测细胞NBT积分。3)10、30、50μg/ml PRF处理HL-60细胞48小时,流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b、CD14、CD15、CD13及CD33;流式细胞术检测细胞周期进程。[结果]10、30、50μtg/ml PRF可抑制HL-60细胞的增殖;瑞氏染色法表明:HL-60细胞经过PRF处理后,部分细胞形态出现分化特征;细胞周期检测发现:PRF使细胞G0-G1期比例增加,S期比例减少,影响细胞周期进程;流式细胞术检测细胞表面分化抗原发现:PRF处理后的HL-60细胞表面分化抗原CDllb、CD15表达增加,CD14低表达,CD33表达下降,CD13表达无明显变化;NBT实验显示:药物作用后的细胞中出现蓝紫色颗粒,NBT积分随药物浓度增加而升高。[结论]较低浓度PRF(10、30、50μg/ml)体外抑制HL-60细胞增殖,影响细胞周期进程;可诱导HL-60细胞向粒细胞样细胞分化,具体机制有待进一步研究。
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