【摘 要】
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细胞应激效应及其分子机制的初步研究应激可以严重干扰细胞的正常的生命活动.高温和紫外线日常生活中两种最常见的物理刺激,本论文主要研究了高温和紫外照射对细胞生命活动包
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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细胞应激效应及其分子机制的初步研究应激可以严重干扰细胞的正常的生命活动.高温和紫外线日常生活中两种最常见的物理刺激,本论文主要研究了高温和紫外照射对细胞生命活动包括细胞周期及凋亡的影响.第一部分热应激细胞效应的基本特征1热休克对A549细胞周期的影响42℃×1小时热休克处理可以引起A549细胞周期产生两种阻滞,一个在G1期,另一个在G2/M期.产生这两种不同的阻滞结果可能是因为热休克时细胞所处的细胞周期时相不同.2热休克对Jurkat细胞周期的影响相同条件的热休克处理对Jurkat细胞周期的影响与A549细胞不同.3热休克对G1期同步化A549细胞的影响4热休克对细胞凋亡的影响5热休克引起的细胞周期阻滞的机制第二部分Hsp90特异性抑制剂geldanamycin(GA)对细胞周期的影响1热休克细胞中hsp90α、hsp90β mRNA表达增加应用竞争性RT-PCR技术检测热休克处理的Jurkat细胞中hsp90α和hsp90β mRNA水平的变化,发现热休克后两种mRNA显著增加.说明热休克对hsp90α和hsp90b有很强的诱导作用.2GA对细胞周期的影响在正常培养条件下GA对Jurkat细胞和A549细胞周期的运行有明显的阻滞作用并可诱导细胞发生凋亡.3 Hsp90对细胞维持正常生命活动至关重要在热休克和非热休克条件下用GA处理A549细胞,培养48小时后,发现无论是否受到热休克处理细胞均发生明显的形态学改变.第三部分UVC对细胞周期与凋亡的影响1 UVC对Jurkat细胞凋亡的诱导2 UVC对A549细胞周期及凋亡的影响第四部分hsp90β基因第一外显子中非典型p53结合位点对hsp90β启动子活性的影响通过竞争性RT-PCR技术检测了hsp90β基因第一外显子中非典型p53结合位点在热休克和UVC照射后对hsp90β启动子活性的影响,发现该位点无论在组成性状态下还是应激条件下均可增加hsp90β启动子活性,该位点突变后,hsp90β启动子活性明显降低.在此实验中还发现热休克可以诱导hsp90β基因启动子活性,而UVC照射后hsp90β基因启动子活性明显受到抑制.
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