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研究目的:明确LRP1(Low-density lipoprotein receptor-related protein-1,LRP1)在原发性免疫性血小板减少症(Primary immune thrombocytopenia,ITP)中的表达情况。初步探索LRP1在ITP中的作用机制,并观察地塞米松(dexamethasone,DXM)对ITP患者LRP1表达情况的影响。研究方法:采集105例ITP患者及30例健康成人外周枸橼酸钠抗凝6ml,利用密度梯度离心的方法获得PBMC(Peripheral Blood Mononuclear Cell),经过总RNA提取后反转录制备cDNA,以GAPDH作为管家基因,采用实时荧光定量PCR(Taqman探针法)检测LRP1 mRNA的相对表达水平。比较正常对照组及ITP患者外周血PBMC中LRP1 mRNA相对表达水平的差异性,探索LRP1与ITP发生发展的可能相关性。利用生物信息学(Immusort数据库)分析外周血细胞中LRP1的表达情况,采用流式细胞术检测外周血PBMC中单核细胞、淋巴细胞以及中性粒细胞膜上和膜内LRP1蛋白的表达情况。分析外周血细胞中LRP1的表达情况。接下来,利用流式细胞检测外周血Th17及Treg细胞比例,同时使用实时荧光定量PCR(SYBR Green法)检测ITP患者和正常对照组外周血Th17和Treg细胞分泌的相关细胞因子mRNA的相对表达情况。在体外将ITP患者PBMC与si LRP1共孵育12h、24h后,采用实时荧光定量PCR(SYBR Green法)检测Th17和Treg细胞分泌的相关细胞因子mRNA表达水平。采集ITP患者新鲜外周血,磁珠法分离单核细胞,体外加入siLRP1孵育24h后,利用荧光定量PCR检测IKK-NF-?B通路相关分子mRNA的相对表达水平,并应用流式细胞术检测单核细胞NF-?B的磷酸化水平。分析LRP1对Th17/Treg细胞功能的影响,探索LRP1在ITP发病机制中的可能调控作用。最后,对20例接受DXM治疗的新诊断和慢性ITP患者进行随访研究3-6个月,观察其疗效及LRP1mRNA表达情况的变化,分离14例病情缓解患者的治疗前外周血PBMC,使用不同浓度激素处理24h后,利用荧光定量PCR检测PBMC中LRP1 mRNA表达的情况,观察激素对LRP1表达水平的影响。结果:与正常对照组相比,ITP患者PBMC中LRP1 mRNA表达量显著降低,两组差异具有统计学意义。LRP1蛋白主要表达于单核细胞上,并且膜内与膜上均有表达,与正常对照组相比,ITP患者单核细胞膜上和膜内的LRP1表达均显著下降。ITP患者外周血Th17细胞比例增高,且Th17细胞相关细胞因子的表达也显著增高,而Treg细胞比例下降,且Treg细胞相关细胞因子的表达也显著降低。si LRP1处理ITP患者PBMC后,与培养基刺激组相比,Th17细胞相关细胞因子表达上升,而Treg细胞相关细胞因子表达下降。siLRP1刺激ITP患者单核细胞后,与正常对照组相比,IKK、NF-?B mRNA的相对表达水平上升,且NF-?B的磷酸化水平升高。经DXM治疗病情缓解的14例患者LRP1 mRNA表达水平较治疗前上升,差异具有统计学意义。体外激素刺激ITP缓解患者的治疗前PBMC,随着刺激激素浓度的增加,LRP1 mRNA的表达水平升高,呈现剂量依赖性。结论:ITP患者中LRP1 mRNA表达水平明显下降,LRP1参与了ITP的发病机制。LRP1主要表达于单核细胞,可能通过负向调控单核细胞的IKK-NF-?B信号通路,进而对Th17/Treg细胞功能产生影响,参与了ITP的发展。DXM治疗可以正调控LRP1的表达,且这种作用呈现剂量依赖性。