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目的：通过观察1,25二羟维生素D3对豚鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的发病情况、病理改变、T细胞亚群的分布及功能、细胞因子的含量和Th1/Th2平衡的影响，探讨1,25二羟维生素D3对EAE发病有无保护作用及可能的免疫学作用机制，探讨治疗多发性硬化的新途径。
方法：采用粗制碱性髓鞘蛋白(MBP)加福氏完全佐剂皮下注射的方法建立EAE模型。将50只豚鼠随机分成5组：正常对照组、EAE对照组、EAE低剂量治疗组、EAE中剂量治疗组和EAE高剂量治疗组，每组10只，造模前3天正常对照组和EAE对照组每天灌喂0.4ml花生油，EAE低剂量、中剂量、高剂量治疗组分别在造模前3天开始灌喂含1,25二羟维生素D30.5μg/kg.d、1.25μg/kg.d、2.5μg/kg.d的花生油0.4ml，直到整个实验结束。EAE对照组、低、中、高剂量治疗组发病高峰期，处死动物，未发病的动物观察2个月处死，正常对照组四周后处死动物。观察豚鼠发病的潜伏期、进展期和神经功能症状；光镜观察动物病理变化；流式细胞仪法测定正常对照组和EAE模型组高峰期外周血T细胞亚群；酶联免疫吸附(ELISA)法测定正常对照组和EAE模型组高峰期外周血单个核细胞分泌的细胞因子IFN-γ、IL-4的水平和高峰期脑组织细胞因子IL-10含量；放射免疫法测定正常对照组和EAE组高峰期脑组织细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-a的含量。
结果：正常对照组豚鼠未发病，EAE模型组豚鼠发病后神经功能障碍明显，豚鼠的大脑、小脑、脑干和脊髓等部位都出现了EAE典型的病理改变。EAE低、中、高剂量治疗组的潜伏期比EAE对照组长(P＜0.01、P＜0.05)，高剂量治疗组潜伏期比中、低剂量治疗组长(P＜0.05)。EAE高、中、低剂量治疗组进展期无差异，但与EAE对照组相比，进展期明显缩短(P＜0.05)。高、中剂量治疗组发病高峰期神经功能障碍评分比EAE对照组明显降低(P＜0.05)。EAE高剂量治疗组死亡率比EAE对照组明显降低(P＜0.05)。EAE对照组CD4+、CD8+含量比正常组降低(P＜0.01)，高、中、低剂量治疗组CD4+、CD8+含量比EAE对照组高(P＜0.01、P＜0.05)；EAE对照组CD4+/CD8+比值比正常组高(P＜0.01)，高、中、低剂量治疗组CD4+/CD8+比值比EAE对照组降低(P＜0.01、P＜0.05)。EAE对照组外周血单个核细胞分泌IL-4的能力较正常对照组明显降低(P＜0.01)，EAE高、中、低剂量治疗组外周血单个核细胞分泌IL-4的能力较EAE对照组明显增强(P＜0.01)。EAE对照组外周血单个核细胞分泌IFN-γ的能力较正常对照组明显增强(P＜0.01)，EAE高、中、低剂量治疗组外周血单个核细胞分泌IFN-γ的能力较EAE对照组明显减弱(P＜0.01)，EAE中剂量治疗组外周血单个核细胞分泌IFN-γ的能力较EAE低剂量治疗组明显减弱，比EAE高剂量治疗组增强(P＜0.01、P＜0.05)。EAE对照组脑组织IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-a含量比正常组高(P＜0.05、P＜0.01)，EAE高、中、低剂量治疗组脑组织IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-a含量比EAE对照组低(P＜0.05、P＜0.01)，EAE高、中剂量治疗组脑组织IL-2、TNF-a含量比EAE低剂量治疗组低(P＜0.05)。EAE对照组脑组织IL-10含量比正常对照组明显降低(P＜0.05)，EAE高、中、低剂量治疗组脑组织IL-10含量较EAE对照组明显增强(P＜0.05)，EAE高剂量治疗组脑组织IL-10含量比EAE低剂量治疗组增强(P＜0.05)。相关性分析显示：发病高峰期EAE对照组外周血CD4+含量及EAE对照组、EAE各治疗组外周血CD8+含量与EAE发病的潜伏期呈明显正相关，与进展期和高峰期神经功能障碍评分呈明显负相关,EAE高剂量治疗组CD4+/CD8+比值与EAE发病的潜伏期呈明显负相关，与高峰期神经功能障碍评分呈明显正相关。外周血Th1/Th2比值、脑组织炎性细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-a)的水平与EAE发病的潜伏期呈负相关，与进展期和高峰期神经功能障碍评分呈正相关。
结论：1.EAE豚鼠神经功能障碍明显，脑和脊髓血管周围炎性细胞浸润、白质脱髓鞘改变。
2.EAE豚鼠外周血CD4+、CD8+含量下降、CD4+/CD8+比值升高，存在T细胞亚群失衡。
3.外周血单个核细胞分泌IFN-γ的能力增高，分泌IL-4的能力降低，存在Th1细胞过度活化、Th2细胞分泌活性降低而呈向Th1细胞漂移。
4.高峰期脑组织炎性细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-a)含量增高，免疫抑制因子IL-10含量降低。
5.1,25二羟维生素D3对EAE发病豚鼠具有保护作用：能延长EAE发病的潜伏期、缩短EAE发病的进展期、减轻神经功能障碍、降低高峰期死亡率。
6.1,25二羟维生素D3能提高外周血CD4+和CD8+含量、降低CD4+/CD8+比值，具有调节T细胞亚群失衡和纠正CD4+/CD8+比值倒置的作用；并且1,25二羟维生素D3能抑制外周血单个核细胞分泌IFN-γ，促进外周血单个核细胞分泌IL-4，提示其具有抑制Th1细胞的活性、提高Th2细胞的分泌能力，具有调节Th1/Th2失衡的作用；1,25二羟维生素D3能升高脑组织免疫抑制性细胞因子IL-10的含量；能降低脑组织炎性细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-a的含量。
7.1,25二羟维生素D3对EAE的防治作用可能与其调节T细胞亚群失衡、矫正CD4+/CD8+比值倒置、调节Th1/Th2失衡及抗炎活性的作用有关。