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研究表明,调控哺乳动物与果蝇造血细胞发育的转录因子及信号途径具进化保守性。虽然目前已经鉴定出很多调控血细胞发育的转录因子,但仍有很多造血发育调控基因有待鉴定,其分子调控机制有待深入研究。阐明造血谱系的调控机制对防治血液疾病具有重要的临床意义。CG8419基因(脊椎动物同源基因为TRIM45)是我室克隆鉴定的一个调控造血干细胞发育候选基因。生物信息学分析表明,该基因具有环型锌指、B盒型锌指、螺旋卷曲螺旋结构域(三元模体)和IG-FLMN蛋白结构域结构域。我室之前的研究提示,CG8419基因可能与造血细胞的发育相关。为进一步研究该基因在果蝇造血细胞发育中的功能,本文首先通过胚胎原位杂交和抗体染色技术确定CG8419基因的时空表达谱。结果表明该基因在胚胎前期和中期头部中胚层弱表达,而晚期在唾液腺表达强烈,在脂肪体、中枢神经系统、气管及前胃等组织中也有表达。利用P因子敲除方法建立了CG8419基因的敲除品系,用抗CG8419抗体进行的Western blotting检测结果表明,两个敲除系中的CG8419蛋白表达量显著减低,表明成功构建了CG8419基因敲除品系。进一步通过RT-PCR证明CG8419基因P因子插入突变系和敲出系中血液发育标记基因Srp、Lz和Gcm的mRNA水平出现明显下调。Srp基因是目前已知果蝇造血干细胞分化发育的最早调控基因,我们制备了该基因的多克隆抗体,用该抗体进行Western blotting检测结果表明,CG8419 P因子插入突变系和敲除系中的Srp蛋白表达都有不同程度下调,结果说明CG8419可能处于Srp上游,参与果蝇血细胞的发育调控过程。进一步对果蝇成熟含晶细胞及所有He标记血细胞的表型观察发现：CG8419基因P因子插入突变系和敲出系中含晶细胞和所有循环的血细胞与野生型相比都有不同程度的减少,表明CG8419基因与果蝇血细胞的形成密切相关。总之,上述研究结果表明CG8419基因是一个调控果蝇造血干细胞形成和分化的新基因,可能位于造血干细胞分化发育的最早调控基因Srp上游。该研究结果为深入阐明CG8419基因在果蝇造血干细胞形成和分化中的重要功能奠定了基础。