PDSS2基因过表达影响结肠癌细胞生长的初步研究

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目的:通过观察PDSS2基因过表达对人结肠癌SW480、HCT116细胞的细胞生长、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移及侵袭能力等生物学行为的影响,为明确PDSS2与结肠癌的关系提供依据。方法:1、构建PDSS2过表达质粒(PC3.1-PDSS2);2、分别转染结肠癌SW480、HCT116细胞,实验分为两组:对照组(SW480组、HCT116组)转染空白质粒、实验组(PDSS2组)转染PDSS2过表达质粒;3、MTS检测细胞生长和增殖情况;4、流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率;5、Transwell法和划痕实验检测细胞迁移能力和细胞侵袭能力的变化。结果:(1)MTS检测细胞增殖:a、SW480实验组细胞d1、d2、d3增殖率分别为117.54%、161.19%、316.79%,其对照组为127.24%、206.72%、425.00%,差距具有统计学意义(P<0.01);PDSS2过表达d1、d2、d3对SW4080细胞增殖的抑制率分别为7.62%、22.02%、25.46%,对照组为0.00%、0.00%、0.00%,差距具有统计学意义(P<0.01)。b、HCT116实验组细胞d1、d2、d3增殖率分别为115.04%、150.81%、248.37%,其对照组为118.97%、164.43%、289.33%,差距具有统计学意义(P<0.01);PDSS2过表达d1、d2、d3对HCT116细胞增殖的抑制率分别为5.98%、10.82%、16.53%,对照组为0.00%、0.00%、0.00%,差距具有统计学意义(P<0.01)。(2)流式细胞仪检测细胞周期:a、SW480实验组G1期细胞占70.24%,其对照组59.54%;SW480实验组S期细胞25.00%、G2期4.77%,均低于其对照组的33.86%、6.60%;b、HCT116实验组G1期细胞占68.25%,其对照组57.10%;HCT116实验组S期细胞18.12%、G2期13.63%,均低于其对照组的24.14%、18.76%。(3)流式细胞仪检测细胞凋亡:a、SW480实验组细胞总凋亡率11.03%,其对照对照组为7.58%(P=0.012)。b、HCT116实验组细胞总凋亡率为16.03%,其对照组为13.01%(P=0.015)。(4)划痕实验显示培养48h后,a、SW480实验组细胞间距离为|445.62±27.45|,其对照组为|335.03±31.69|;b、HCT116实验组细胞间距离为|259.34±13.2|,其对照组为|188.38±9.5|。(5)Transwell法检测:a、SW480实验组迁移细胞数为136.5±13.25,其对照组为350.50±30.17,差距均具有统计学意义(P<0.01);SW480实验组侵袭细胞数为59.17±9.85,其对照组为140.50±27.08,差距均具有统计学意义(P<0.01);b、HCT116实验组迁移细胞数为19.83±2.32,其对照组为63.17±16.07,差距均具有统计学意义(P<0.01);SW480实验组侵袭细胞数为8.83±1.72,其对照组为37.33±4.27,差距均具有统计学意义(P<0.01)。结论:(1)PDSS2基因过表达可以抑制结肠癌细胞SW480、HCT116的增殖,阻止其从G1期向S期转化;(2)PDSS2基因过表达可以影响结肠癌细胞SW480、HCT116细胞周期的调节。(3)PDSS2基因过表达可以诱发结肠癌细胞SW480、HCT116的早期凋亡;(4)PDSS2基因过表达可以抑制结肠癌细胞SW480、HCT116的迁移和侵袭能力。
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