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huGM-CSF和huIL-6这两种细胞因子既具有协同作用又具有互补作用，它们的融合可能构成一种新的具有多重生物学功能的高效造血因子。基于此我们考虑构建GM-CSF／IL-6融合蛋白。 结构与功能研究表明，GM-CSF N端的1～13位氨基酸并非生物学活性所必需，且干扰与受体的结合。另外，GM-CSF的第9个氨基酸是脯氨酸，把它作为融合蛋白的第1个氨基酸有利于抵抗细菌内切酶的降解。而IL-6N端的28个氨基酸对其活性也不是必需的，去除可提高其活性，研究表明去除前23个氨基酸的IL-6，其相对活性更高。为了利于融合蛋白的高效表达及高活性产物的获得，本研究设计了六种GM-CSF／IL-6融合蛋白基因序列，它们分别是GM-CSF（9-127）-IL-6（29-184）（简称GI1），GM-CSF（9-127）-IL-6（1-184）（简称GI2），GM-CSF（1-127）-IL-6（1-184）（简称GI3），GM-CSF（9-127）-IL-6（24-184）（简称GI4），IL-6（1-184）-GM-CSF（9-127）（简称IG1），IL-6（24-184）-GM-CSF（9-127）（简称IG2）。 应用PCR技术对huGM-CSF和huIL-6的基因分别加以改造，同时在二者之间加上连接肽序列（G-G-S-G-S）3，克隆PCR产物，构建含有上述六种融合蛋白基因的pUC18质粒，并测序，测序结果表明，所构建的六种融合蛋白基因序列均与理论设计完全一致，进一步将融合蛋白基因克隆到pBV220载体，获得融合蛋白表达质粒，表达质粒分别导入E.coli DH5α和BL-21（Gold）中诱导表达，结果六种融合蛋白在两种宿主菌中均获得高效表达，它们在BL-21（Gold）宿主菌中的表达量均占总蛋白含量的30％以上，表达产物以包涵体的形式存在。