【摘 要】
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目的:检测肝泡型包虫病合并胆道侵犯患者胆汁中外泌体miRNAs的表达情况,寻找胆道侵犯生物标记物,为后期研究胆道侵犯机制奠定基础。方法:收集2017年8月至2018年10月就诊于青海大学附属医院、诊断为肝泡型包虫病的病人胆汁样本共12例,观察组(胆道侵犯组)与对照组(非胆道侵犯组)各6例。经超速离心法提取、WB检测及透射电镜观察联合鉴定胆汁中的外泌体结构后,采用Trizol法提取外泌体总RNA,再
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目的:检测肝泡型包虫病合并胆道侵犯患者胆汁中外泌体miRNAs的表达情况,寻找胆道侵犯生物标记物,为后期研究胆道侵犯机制奠定基础。方法:收集2017年8月至2018年10月就诊于青海大学附属医院、诊断为肝泡型包虫病的病人胆汁样本共12例,观察组(胆道侵犯组)与对照组(非胆道侵犯组)各6例。经超速离心法提取、WB检测及透射电镜观察联合鉴定胆汁中的外泌体结构后,采用Trizol法提取外泌体总RNA,再经miRNAs表达谱芯片实验检测并寻找差异表达的miRNAs。根据差异miRNAs预测胆道侵犯靶基因,并进行通路富集分析。结果:经超速离心法提取的各胆汁样本中外泌体浓度均可满足WB检测及miRNAs表达谱芯片上样要求。经芯片实验,观察组与对照组比较,共有74个差异表达的miRNAs,其中9个表达上调,65个表达下调。根据差异miRNAs预测到45个胆道侵犯靶基因,如AFF3、STK4、PIK3R1等。经Pathway分析,靶基因主要富集在Pathways in cancer(肿瘤发生)、Phosphatidylinositol signaling system(磷脂酰肌醇信号系统)、PTEN等通路中。经GO注释及富集分析,靶基因主要富集在Positive regulation of gene repression(基因抑制的正向调控)、Regulation of cell differentiation(调控细胞分化)等生物过程。结论:建立了HAE合并胆道侵犯胆汁中外泌体差异miRNAs表达谱,它们可作为胆道侵犯的候选生物标记物。初步探索了差异miRNAs对靶基因的调控网络,为研究胆道侵犯机制奠定了基础。
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