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家蝇以腐殖质为食，生存环境伴随有许多病菌的滋生，因此，家蝇拥有强大的免疫调控机制来抵御病菌的侵害。根据本实验室家蝇转录组和 NCBI公布的家蝇基因组两大数据库，分析核转录因子Nrf2和其抑制剂Keap1的生物信息，这两种蛋白在家蝇体内大小分别为858和924个氨基酸，Keap1的理论分子量为95.75 ku，理论等电点为7.68，Nrf2相对分子量为113.72 ku，理论等电点为5.73。二级和三级结构预测显示，Keap1主要具有BTB和Kel ch两个保守结构域，其中BTB和泛素连接酶3结合，Kelch与 Nrf2结合。Nrf2主要包含碱性亮氨酸拉链，用于结合特殊的DNA序列。选择保守结构域序列，构建原核表达载体，用于抗体制备和Western Blot检测。 本研究采用实时荧光定量PCR对Keap1和Nrf2基因核酸表达量进行检测，实验组选取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌刺激刺激后6h、12h、24h、48h、72h五个点的家蝇幼虫作定量分析，对照组为未做菌刺激（0 h）的幼虫，结果显示，细菌刺激后Keap1基因呈下调趋势，Nrf2基因呈上调趋势。在组织定量分析，Keap1在脂肪体中表达量最高，具有显著性，在血细胞中表达量最低。Nrf2在肠道中表达量最高，在表皮中最低。用含有Keap1-dsRNA和 Nrf2-dsRNA的工程菌干扰家蝇幼虫，对干扰后目的基因RNA表达水平进行检测，检测结果显示，Keap1和Nrf2基因均被敲低，效果显著。幼虫被干扰后再次菌刺激，Keap1敲低组的幼虫在菌刺激6h的死亡率高于对照组，相反，Nrf2敲低组在菌刺激6 h的死亡率明显低于对照组。SOD、CAT、POD这3种抗氧化保护酶在热激处理15min，30min，1h时表现为活性升高，在恢复正常饲养温度1h、2h后活性恢复，可以推断热激处理对机体造成氧化损伤。通过Western Blot检测显示，热激处理时，Keap1蛋白表达量下调，Nrf2表达量上调。