MiR-152和COL4A-1在甲状腺乳头状癌的表达及临床意义

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目的:明确MiR-152和COL4A-1在甲状腺乳头状癌中的表达水平,阐明MiR-152在甲状腺乳头状癌中的作用及机制。方法:收集湖南省人民医院2016年4月—2017年10月经病理确诊的甲状腺乳头状癌患者的手术切除新鲜标本50例,所有患者术前均未行放疗、化疗及其它抗肿瘤的治疗。分别取甲状腺乳头状癌组织以及癌旁组织(距癌组织>2 cm)。全部标本手术后30 min内置于-80℃液氮中保存。免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)和实时定量荧光PCR(Real Time-PCR,RT-PCR)分别检测甲状腺乳头状癌癌组织和癌旁组织中MiR-152和COL4A-1的表达水平,通过慢病毒转染甲状腺乳头状癌BCPAP细胞株的方法构建MiR-152过表达或敲低的细胞株,双荧光素酶报告基因试验检测MiR-152对COL4A-1启动子活性的影响,实时定量荧光PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测MiR-152过表达或敲低的BCPAP细胞株中COL4A-1的蛋白和mRNA水平。结果:1.MiR-152在甲状腺乳头状癌癌组织中的表达水平低于癌旁组织,甲状腺乳头状癌组中COL4A-1的表达水平明显高于癌旁组织。2.与MiR-152敲低的阴性对照甲状腺乳头状癌细胞BCPEP株(MiR-152NC)相比,MiR-152基因敲低的甲状腺乳头状癌细胞BCPEP株(MiR-152KD)MiR-152的表达明显降低,而MiR-152过表达的甲状腺乳头状癌细胞BCPEP株(MiR-152 OE)中MiR-152的表达明显增加,表明在甲状腺乳头状癌细胞株BCPEP中成功构建了 MiR-152基因过表达和敲低的稳定细胞株。3.MiR-152能负向调节甲状腺乳头状癌细胞中COL4A-1的表达。4.COL4A-1是MiR-152的潜在靶基因。结论:1.MiR-152在甲状腺乳头状癌中低表达,COL4A-1在甲状腺乳头状癌中高表达2.MiR-152可能存在调控甲状腺乳头状癌的增殖和迁移的作用。3.MiR-152可能靶向负调控COL4A-1的表达。
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