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目的:通过实验研究的方法,观察电针对脊髓损伤后神经源性膀胱尿动力学的影响以及对模型动物兔中枢和周围神经的影响,以探讨电针治疗神经源性膀胱的作用机制。
方法:本实验将30只健康成年雌性新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组,每组10只。采用改良Allens法建立脊髓损伤后神经源性膀胱模型。空白组:暴露脊髓后,不予造模处理,然后关闭切口;模型组:造模后,不予任何治疗;电针组:造模后,电针“夹脊”、“会阳”穴治疗。电针采用疏密波(频率4Hz/20Hz),电流输出强度以背部肌肉出现轻微抽动为度,每次持续30分钟。电针每日一次,共治疗28天。造模后,每日挤压下腹协助排尿。术前、术后1d、7d、14d、28d行尿动力学检查;术后28天,分别取兔脊髓损伤段脊髓组织,采用免疫组化法测定NGF阳性细胞计数的表达水平;分别取其膀胱体部逼尿肌,用RT-PCR方法检测其M2、β3受体mRNA表达水平;术前、术后麻醉清醒后1h、术后1d、7d、14d、28d通过分析改良Tarlov评分法比较各组兔后肢运动功能状况。统计分析以均数±标准差((X)±S)表示,差异性采用单因素方差分析进行比较,以P<0.05为显著性差异标准。
结果:1.尿动力学评价:①术前:三组比较最大膀胱测量容量(Maximum Cystometric Bladder Capa city,MCBC)和(最大逼尿肌压力,Maximum Pressure of detrusor,Pdetmax)差别均无统计学意义(P>0.05)②术后1d:空白组术前与术后1d的MCBC与Pdetmax差别均无统计学意义(P>0.05);模型组与电针组MCBC较空白组明显升高,Pdetmax较空白组明显降低,有显著性差异(P<0.05)。模型组与电针组进行比较,MCBC与Pdetmax差别均无统计学意义(P>0.05)③术后7d:模型组与电针组进行比较,MCBC与Pdetmax差别均无统计学意义(P>0.05)④术后14d:模型组与电针组进行比较,MCBC差别无统计学意义(P>0.05);Pdetmax差别有显著性意义(P<0.05)⑤术后28d:模型组与电针组进行比较,MCBC与Pdetmax均有显著性差异(P=0.01<0.05)。2.脊髓组织NGF阳性细胞的表达水平:模型组与电针组较空白组NGF阳性细胞数增多,且有显著性差异(P<0.05);模型组与电针组进行组间比较,电针组NGF阳性细胞数显著强于模型组,有显著性差异(P=0.01<0.05)。3.后肢运动功能变化特点:空白组兔第1~4周Tarlov评分5级(行走正常)。分别对模型组与电针组进行比较,两组术后改良Tarlov评分均值逐渐升高,电针组较模型组评分值高,术后28d时,电针组评分值与模型组相比有明显升高,且有显著性差异(P=0.04<0.05)。4.膀胱组织的M2受体与β3受体的mRNA表达:用real-time PCR的方法,对各组膀胱组织的M2受体与β3受体的mRNA表达水平进行比较。结果显示各组之间无显著性差异(P>0.05),但脊髓损伤后膀胱组织的M2受体和β3受体的mRNA表达均有减少的趋势,但模型组和电针组之间趋势基本一致,无显著性差异(P>0.05)。
结论:1.脊髓损伤后造成神经源性膀胱,在尿动力学表现为膀胱容量增加,逼尿肌压降低;2.电针治疗后可提高逼尿肌压力,且有降低神经源性膀胱膀胱容量的趋势,说明电针夹脊穴和会阳穴可改善脊髓损伤后的膀胱功能。3.脊髓损伤后,NGF在脊髓节段的表达显著增高,电针组较空白组、模型组NGF的表达显著增加。说明电针可能通过激发损伤段脊髓组织中NGF的表达促进损伤的恢复。4.脊髓损伤后,膀胱逼尿肌M2受体和β3受体mRNA水平具有下调的趋势,说明脊髓损伤后膀胱功能的异常与两个受体的下调可能具有相关性,但电针夹脊穴和会阳对其影响无显著性。5.脊髓损伤后会造成下肢运动功能障碍,电针夹脊穴和会阳可显著加速下肢运动功能的恢复。