大鼠脊髓损伤后前凋亡蛋白Bim表达的改变及其意义

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目的:观察Bim(前凋亡蛋白)在正常以及损伤脊髓细胞中的表达变化,研究Bim与细胞凋亡的关系,探讨急性脊髓损伤后Bim的表达与细胞凋亡在时间分布上的特点及意义。方法:将64只健康SD大鼠随机分为8个处理组,其中4组为实验组,4组为对照组。实验组采用改良Allen法打击T8-T10节段制作脊髓损伤模型,使用10g金属棒从2.5cm高度垂直打击脊髓,对照组只切开相同节段椎板不损伤脊髓。所有动物均于伤后1h、3h、6h、12h(每个时间点各取8只)应用改良Tarlov评分法评价其神经功能,然后处死动物,取受损节段脊髓行HE染色及免疫组化染色,观察神经细胞的形态学变化和Bim在脊髓组织中的分布特点;TUNEL方法检测神经细胞凋亡。使用IPP6.0(Image-Pro Plus)图像分析软件进行Bim表达量及细胞凋亡量的测量。使用IOD (integrated optical density)累计光密度表示Bim表达的结果。使用IPP6.0图像分析软件测定各结果的凋亡率。凋亡率=(10个视野凋亡细胞数/10个视野总细胞数)×100%。结果:实验组出现不同程度的下肢功能障碍,而对照组大鼠均未见明显瘫痪,实验组在各时间点的Tarlov评分均低于对照组(p<0.01),对照组各时间点未观察到明显细胞凋亡和细胞坏死,实验组出现不同程度的细胞凋亡和细胞坏死。实验组Bim表达量在各时间点均高于对照组(p<0.01),实验组的Bim表达于1h增高,6h后达到高峰,12h降低,即1h<3h<6h>12h。结果表明Bim表达与细胞凋亡在时间上具有一致性,存在正性相关(p<0.01)。结论:急性脊髓损伤能够诱导Bim(前凋亡蛋白)的表达,此时神经细胞的凋亡与Bim表达量的增大有关。
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