贯叶连翘粗提物中金丝桃素的分离纯化研究

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本工作以具有抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒疾病等重要生理活性的金丝桃素为研究对象,首先从理论上计算了金丝桃素分子印迹聚合物的最佳合成条件,并对金丝桃素的分离提取方法——分子印迹技术进行了深入而系统的研究,同时建立了贯叶连翘粗提物中金丝桃素含量的测定方法,具体内容摘要如下:1.用MOPAC 2007软件中的PM6方法研究了以金丝桃素为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂的分子印迹预组装体系。通过计算机模拟考察了功能单体浓度、交联剂浓度对模板-功能单体复合物浓度的影响,从理论上计算了金丝桃素分子印迹聚合物的最佳合成条件。而且,通过模拟也有助于解释实验现象以及合成特异性和亲和性分子印迹聚合物,为合成金丝桃素分子印迹聚合物提供了理论上的指导。2.分子印迹分离技术在中草药活性成分的分离纯化方面的应用文献报道不多。本研究采用分子印迹技术首次以金丝桃素为模板分子,在计算机模拟预组装体系的理论指导下,制备了金丝桃素分子印迹聚合物,并考察了分子印迹聚合物的吸附性能和选择性能。结果表明,分子印迹聚合物对模板分子具有高度的选择性和专一的识别性,展示了该技术的应用前景;通过红外光谱对分子印迹聚合物的形成进行了探讨。3.建立了薄层色谱扫描(TLC)测定贯叶连翘粗提物中金丝桃素含量的方法。在用Na2CO3(0.4 mol/L)溶液处理过的硅胶G板上用石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇(1∶4∶2)混合展开剂上行展开后,采用日本岛津CS-930型薄层色谱扫描仪,在检测波长591 nm处进行TLC定量测定。结果表明,金丝桃素点样量在0.0~14.4μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系,r为0.9892,回收率范围为96.4%~100.1%。本方法操作简便、快速、结果准确可靠,为后续实验研究提供了快速的定性定量检测手段。同时也对金丝桃素的稳定性进行了研究,得出了具有指导意义的结果。本论文利用计算机应用程序对分子印迹聚合物的制备条件进行了理论分析,为合成金丝桃素分子印迹聚合物提供了数据分析,减少了实验次数,大大节省了人力、物力和财力,并且为分子印迹聚合物性质考察提供了一种简便、快速、准确的检测方法。将分子印迹技术应用于天然产物中金丝桃素活性成分的分离,为天然产物活性成分的分离纯化开辟了一条新途径。
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