论文部分内容阅读
目的 探讨常规细胞遗传学(conventional cytogenetics, CC)、巢式逆转录-聚合酶链反应(nested-reverse transcriptase polymerase chain reaction, nested-RT-PCR)及双色双融合荧光原位杂交(dual-color and dual-fusion fluorescence in situ hybridization, D-FISH) 三种技术监测慢性髓性白血病(chronic myeloid leukemia，CML)患者治疗过程中肿瘤负荷的灵敏度和特异性。方法 联合应用CC、巢式RT-PCR 和D-FISH三种技术对12例治疗中CML患者的肿瘤负荷水平进行检测。结果 对5例INF-α治疗的CML患者治疗前后的24份骨髓标本检测显示，23份标本检出不同比率的Ph染色体，所有标本RT-PCR检测结果均为阳性。1份Ph(-)bcr/abl(+)标本（取自病例2 INF-α治疗后75个月）经FISH检测发现仍有4.5%的bcr/abl(+)细胞；对三组经CC检测Ph染色体阳性率相同的标本（分别取自病例1治疗后22个月、26个月，病例5治疗后12个月、16个月及病例4治疗后6个月、10个月），进一步行FISH检测，分别检出47.5%和39.5%、74.0%和60.5%、99.0%和99.5%的bcr/abl(+)细胞。对7例非清髓性异基因造血干细胞移植治疗的CML患者治疗前后的40份骨髓标本检测显示，29份标本检出不同比率的Ph染色体， 3份因细胞数少CC分析失败。36份标本RT-PCR检测结果为阳性，4份标本（取自病例6移植后12个月、18个月、26个月、38个月）Ph染色体及RT-PCR结果均为阴性。4份Ph(-)bcr/abl(+)标本（分别取自病例6移植后9个月、10个月、病例7移植后15个月及病例8移植后12个月），经FISH检测分别检出5.4%、0%、16.5%及1.5%的bcr/abl(+)细胞。3份因细胞数少CC核型分析失败的标本（取自病例10移植后20天、60天、病例12移植后40天），经FISH检测bcr/abl(+)细胞检出率分别为55.0%、27.5%和73.5%。1份Ph(-)bcr/abl(-)标本（取自病例6移植后12个月）FISH检测bcr/abl(+)细胞检出率为0%。结论 CC可作为监测CML患者治疗过程中肿瘤负荷水平<WP=6>的基本手段。在移植后早期细胞数少时，CC检测结果无法准确判断体内肿瘤负荷动态变化时，以及治疗病人体内肿瘤负荷降低到CC不能检出而RT-PCR仍为阳性时，需借助FISH来准确检测体内肿瘤负荷，监测其动态变化。FISH检测bcr/abl转阴的病人需靠灵敏度更高的RT-PCR监测。