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肝癌是全世界第五大癌症,每年死亡100万人。近年来,随着对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体(TRAIL-R)研究的不断深入,TRAIL抗肿瘤及抗病毒免疫作用受到人们的普遍关注,在肝癌治疗方面具有广阔的应用前景。研究发现TRAIL的某些形式能够诱导人正常的肝细胞凋亡,因此对TRAIL近期临床应用的安全性产生了焦虑,由于在TRAIL的两种死亡受体中,DR5与TRAIL的亲合力明显高于DR4,研究以死亡受体为靶点的肿瘤生物治疗是目前该领域的热点,人们已经构建许多TRAIL重组体,并作了大量功能实验,以此寻找高效低毒的死亡受体激活剂成为研究目的。研制DR5的活化抗体,激发肿瘤细胞凋亡信号将是抗肿瘤治疗的另一有效途径,因此我们用抗人DR5单克隆抗体替代TRAIL用于肿瘤治疗研究。本研究中,我们重点研究了肝癌细胞株SMMC7721细胞膜表面DR5表达情况,主要通过mRNA水平和蛋白质水平上加以证实。首先应用DR5特异性引物做RT-PCR实验,证实肝癌细胞株SMMC7721细胞内有DR5mRNA表达,应用流式细胞法检测DR5在肝癌细胞株SMMC7721中的表达,通过MTT法检测分析抗人DR5单克隆抗体及低浓度化疗药物阿霉素、5-FU、顺铂对肝癌细胞SMMC7721细胞增殖的抑制率,应用流式细胞仪采用Annexin V-FITC/PI双标记分析抗人DR5单克隆抗体对肝癌细胞SMMC7721细胞凋亡率,包括早期凋亡和晚期凋亡情况。发现DR5在肝癌细胞SMMC7721中高表达。抗人DR5单克隆抗体对肝癌细胞株SMMC7721的凋亡作用呈时间和剂量依赖性,低浓度化疗药物中阿霉素对肝癌细胞株SMMC7721的抑制率大于5-FU(P<0.01),5-FU大于顺铂(P<0.01),抗人DR5单克隆抗体与低浓度化疗药物联合应用较两药单一作用于肝癌细胞SMMC7721有更强的凋亡作用。