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目的：鉴定血管钙化的动物及细胞模型，为观察血管钙化发生发展过程中miRNA表达谱的变化提供可靠的研究模型。方法：1.动物模型的鉴定：SPF级4和12周龄OPG基因敲除小鼠及野生型小鼠，摘其眼球取血样以检测血清中Runx2及ALP水平，处死后分离主动脉组织，10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，HE染色观察主动脉钙化情况，免疫组化观察主动脉Runx2及ALP表达情况。2.细胞模型的鉴定：应用10mmol/L β-甘油磷酸钠（β-GP）处理小鼠血管平滑肌细胞（MOVAS）0、14、21及38天（0天为对照组），通过茜素红染色观察细胞钙化情况。结果：1.动物模型1.1HE染色：4和12周龄野生型小鼠及4周龄OPG基因敲除（OPG-/-）小鼠的主动脉均未见钙化现象，而12周龄OPG-/-小鼠主动脉则出现明显的病理性钙化。1.2免疫组化：12周龄OPG-/-小鼠主动脉组织中ALP及RUNX2均呈高表达，尤其是高表达与钙化斑块区域。1.3ELISA检测：4和12周龄OPG-/-小鼠血清中ALP及RUNX2水平均明显高于同周龄的野生型小鼠（P<0.05）。2.细胞模型小鼠血管平滑肌细胞（MOVAS）在钙化培养基诱导21天时出现较为明显的钙化现象，38天则呈现多发性散在钙化结节。结论：1．4周龄OPG-/-小鼠血清中ALP及RUNX2水平明显升高，但其主动脉未见钙化；12周龄OPG-/-小鼠主动脉出现明显的病理性钙化，且同时伴有血清中及主动脉组织中ALP及RUNX2水平异常升高。2.小鼠血管平滑肌细胞（MOVAS）在β-甘油磷酸钠处理21天时可出现明显的钙化，成功建立了血管钙化细胞模型。第二部分血管钙化过程中microRNA表达谱的动态变化目的：应用miRNA芯片技术，筛选血管钙化过程中差异性表达的miRNA及观察血管钙化发生发展过程中miRNA表达谱的动态变化，旨在为进一步确认调控血管钙化的关键miRNA奠定基础。方法：1.动物模型：病理学鉴定的4周龄OPG-/-小鼠（无主动脉钙化）及12周龄OPG-/-小鼠（明显主动脉钙化）的主动脉组织，及相应周龄的野生型小鼠主动脉组织，分别提取总RNA，应用芯片技术检测各样本的miRNA表达谱，并对芯片数据进行比值及聚类分析等。2.细胞模型：β-甘油磷酸钠处理0天（对照组）及21天（明显钙化组）的MOVAS细胞，分别提取总RNA，应用芯片技术检测各样本的miRNA表达谱，并对芯片数据进行比值及聚类分析等。结果：1.动物模型miRNA表达谱1.14周龄动物：与野生型小鼠相比，OPG-/-小鼠主动脉组织中共有370个差异性表达（倍数改变>1.5倍）的miRNA，其中上调的有miR-125b-5p、miR-126-3p等162个，下调的有miR-320、miR-2861等208个。其中56个有显著差异性（P<0.05），miR-139-5p等33个表达上调，miR-18a-5p等23个表达下调。1.212周龄动物：与野生型小鼠相比，OPG-/-小鼠主动脉组织中共有差异性表达的miRNA有101个，上调的有74个，下调的有27个。其中16个显著差异性表达的miRNAs（P<0.05），高表达的有miR-425-5p、miR-125b-5p等8个，低表达的有miR-29a-5p、miR-187-3p等8个。2.细胞模型miRNA表达谱与对照组（诱导0天）相比，诱导21天出现明显钙化的细胞组有92个差异性表达的miRNAs（倍数改变>1.5倍），其中miR-30a-5p等57个表达上调，miR-29a-5p等35个表达下调。结论：通过芯片技术获得了血管钙化过程中不同阶段的差异性表达的miRNA谱，首次在一定程度上揭示了miR-125b-5p等miRNA族在钙化发生发展中的动态变化规律。