【摘 要】
：
作为极为有效的抗菌药物,β-内酰胺类和多粘菌素类抗生素被广泛应用于食源性疾病的治疗之中,而耐药微生物的出现给这两类药物的使用效果造成了很大影响。微生物耐药性的检测与控制已成为当前重点工作之一。随着微生物耐药机制在基因层面的不断突破,针对耐药基因的检测成为筛查耐药菌株及相应耐药机制的必要手段。在检测过程中,为保证检测结果准确、公正,具有可比较性,标准物质作为质控使用尤为重要。目前,国内外针对核酸标准
【基金项目】
：
“十三五”国家食品安全重点研发计划“食品微生物检验相关参考物质体系研究及评价”（项目编号:2017YFC1601400）；
论文部分内容阅读
作为极为有效的抗菌药物,β-内酰胺类和多粘菌素类抗生素被广泛应用于食源性疾病的治疗之中,而耐药微生物的出现给这两类药物的使用效果造成了很大影响。微生物耐药性的检测与控制已成为当前重点工作之一。随着微生物耐药机制在基因层面的不断突破,针对耐药基因的检测成为筛查耐药菌株及相应耐药机制的必要手段。在检测过程中,为保证检测结果准确、公正,具有可比较性,标准物质作为质控使用尤为重要。目前,国内外针对核酸标准物质的研究多局限于病毒类和转基因类,对耐药机制检测用标准物质的研究和使用几乎为空白,使检测机构与机构之间的结果可比性难以实现,无法形成统一的量化。本研究研制了β-内酰胺类和多粘菌素类抗生素耐药机制编码基因检测用质粒DNA标准样品共8种,获得的具体结果如下:（1）查阅文献,筛选得到5种β-内酰胺类抗生素、3种多粘菌素类抗生素耐药机制编码基因,比对验证结果显示均具有通用性。（2）纯化学方法合成8段基因序列,插入p UC57质粒载体并导入DH5α制备工程菌株。重组菌株15代传代结果表明8种携带耐药机制编码基因的重组质粒遗传稳定性良好。（3）使用试剂盒提取质粒,溶液纯度符合要求。梯度稀释质粒溶液用作模板,结果表明各质粒DNA PCR检出限在1.67×10~4-2.25×10~6拷贝数/μL之间,Real-Time q PCR检出限在1.15-1850拷贝数/μL之间。各质粒DNA的Ct值-模板浓度对数值标准曲线的线性相关系数均大于0.99。（4）真空干燥制备的质粒DNA标准样品均匀性符合要求。在37℃条件下贮存14d、4℃条件下贮存90 d、-20℃条件下贮存360 d后,稳定性检验结果符合要求。（5）多粘菌素类抗生素耐药基因mcr-1质粒DNA标准样品联合定值结果与特征值一致。
其他文献
真实确证是决定反转新闻真实能否得以实现的关键机制。通过对48例反转新闻事件进行清晰集定性比较分析（cs-QCA）,以反转领域、反转程度、反转推动类型等作为解释变量,具体考察反转新闻真实得以实现的关键成因,讨论反转新闻中新闻真实呈现机理和时序。基于移动互联技术下媒介生态结构演变,探讨反转新闻的传播主体和媒介形态是如何实现真实确证的,指出新闻真实元素"消失"和残缺呈现的反转因子多元互动关系;并对真实确
苦荞因其丰富的功能成分和独特的风味出名,目前苦荞的加工较为简单,如何最大程度的开发苦荞的潜在价值,提高其经济和社会效益,是一个很有前景的课题。目前在苦荞加工方面,很少有气流膨化技术的应用,本研究将为未来苦荞新的加工方法提供一定的理论基础。本文主要研究了气流膨化对苦荞籽粒理化及功能成分、抗氧化活性及水分添加量对苦荞米花品质的影响,主要研究结论如下:（1）经过气流膨化处理,苦荞结构发生改变,对苦荞的理
随着云存储技术的成熟,越来越多的个人和企业倾向将数据存储到云服务器,以便节省本地空间。然而,用户将数据上传到云服务器后,将无法完全控制这些数据,从而导致恶意攻击者和云服务器提供商可以随意访问或窃取数据。为了实现数据隐私保护,用户通常在数据上传至云服务器前对其加密,但这面临加密数据的有效检索等问题。可搜索加密技术可以解决此问题,它允许用户在加密数据中执行关键字检索,但现有可搜索加密方案大多存在不支持
蒲城酥梨果大、皮薄、郁香爽口、营养丰富,是中国国家地理标志产品,但目前蒲城酥梨仍以鲜食为主,产业结构单一,抗风险能力差。将蒲城酥梨加工成果酒可以延长蒲城酥梨产业链,改变产业产品单一局面,对陕西蒲城酥梨产业健康发展具有一定推动作用。本文立足于基于香气品质提升的蒲城酥梨果酒酿造工艺创新研究。主要针对不同原料预处理方式（热浸渍）、不同初始糖浓度和不同发酵方式、最适宜发酵菌株的选择等不同工艺进行系统的研究
亚麻籽作为草本植物亚麻的种子,富含多种营养成分,如α-亚麻酸、优质蛋白质、膳食纤维、木脂素及多种抗氧化活性物质,具有调节脂质代谢、降低血糖血脂、改善动脉粥样硬化、心脑血管疾病以及预防癌症等保健功能,在欧美国家已成为一种受欢迎的健康食品,逐渐成为日常膳食的重要来源。目前,我国对亚麻籽的相关研究也取得一定进展,其中以面包、饼干的研究为主。然而对于我国传统主食的报道较少,为评价亚麻籽粉的添加对馒头品质的
核桃青皮是核桃加工过程中产生的副产物,每年可达数百万吨,其中含有丰富的生物活性物质,包括黄酮、多糖、多酚、醌类和色素等,具有抗氧化、抑菌、消炎等功能。因此,进一步开发和利用核桃青皮,对提高核桃产业经济效益,减少资源浪费和环境污染有重要意义。目前,有关核桃青皮抑制α-葡萄糖苷酶活性的研究尚未见报道。为此,本研究采用蒸馏水、70%乙醇/水（v/v）、70%丙酮/水（v/v）对核桃青皮活性物质进行了提取
属性基加密是公钥密码学研究中的一个热点方向,凭借其细粒度访问控制的优势被广泛应用。依据访问控制要求的不同,有必要构造具有不同性质的属性基密码方案,例如多用户环境下的访问控制、身份认证、属性撤销、多授权机构等。论文针对具有特殊性质的属性基密码方案展开研究,主要工作如下:（1）用户属性撤销是属性基加密方案的特性之一,属性的直接撤销模式比间接撤销更加有效,KP-ABE下构造属性直接撤销方案实现起来相对容
随着互联网的飞速发展,信息网络给人类带来很大的便利,但仍面临着一系列安全挑战,如数据的重放、伪造和篡改等攻击。无证书密码体制和数字签名作为密码学的核心技术,不仅解决了传统公钥密码体制中证书管理问题和基于身份的公钥密码体制中密钥托管的难题,而且确保了数字消息的完整性和不可否认性。然而,随着大数据和车联网等新技术的不断涌现,传统的无证书密码方案无法满足新型环境的安全需求。因此,本文提出了基于无证书聚合
中国现代女作家张爱玲在小说创作方面取得了突出成就,她在很多小说中流露出对女性问题的关注和探讨。《倾城之恋》这篇小说深入表现了女性冲破封建旧秩序的艰难和无奈。本文就该小说的女性意识进行探讨,其中所表达的女性意识主要体现为:揭示女性在男权社会中对男性的双重依附;对旧时代女性自我意识的觉醒加以积极的肯定;反映男权社会中女性走向悲剧宿命的无奈。张爱玲用自己独特的方式表达对旧时代女性的同情和悲悯。
随着全世界肥胖育龄女性人数的增加,母代肥胖诱导子代一系列发育相关功能障碍已经成为不可忽视的问题。流行病学和遗传学证据表明,母代肥胖可能会导致自身肠道菌群紊乱,进而肠道菌群在母子代纵向传递过程中诱导子代肠道菌群同步失衡。在子代生命早期“1000天”这个关键时期,肠道菌群的失衡通过其代谢产物的改变直接影响子代认知和社交功能正常。因此发掘营养因子和利用膳食模式干预母代肥胖诱导的子代神经发育障碍的营养学研