辐射与鼻咽癌细胞凋亡及其相关基因表达关系的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lanshuye6
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凋亡是一种具有特定形态和生化改变的细胞死亡过程,是在一系列基因作用下所引起的生化联极反应的结果。因其与肿瘤的发生、生长、治疗与愈后密切相关,目前成为肿瘤研兜的热点之一,尤其在肿瘤的放射治疗中更加引人注目。本实验研究了X线诱导人鼻咽癌细胞系CNE和CNE-2凋亡及其基因学基础,以及人鼻咽癌标本中凋亡指数与相关基因表达的关系。结果如下: 1:应用荧光染料Hoechst33342染DNA的方法我们发现给一定剂量照射后,CNE凋亡指数与时间、剂量呈相关性,照射后2小时凋亡指数逐渐增加,48小时达平台期,照射0、2、4、8、12和20Gy后CNE的凋亡指数分别为2%、10.2%、17.8%、21.4%、24%、27%。在分次放疗中CNE细胞系2Gy/5f/5d组的凋亡指数较5Gy/2f/5d和10Gy/1f/1d组高,分别为37.8%,34.5%和22.8%;照射2Gy后凋亡指数于24小时恢复至初始水平,而5Gy至少需要72小时。 2:CNE-2表现出同样的时间、剂量相关性。照射0、2、4、8、12和20Gy后CNE-2的凋亡指数分别为3.5%,16%,20%,31%、38%、48%。与CNE的凋亡指数有较明显的区别。 3:CNE-2细胞系移植瘤横型照射40y,在30′、2h、6h、12h、24h后其凋亡指数分别为1.32%、1.71%、3.77%和1.91%,而8Gy时为1,84%、4.21%、6.60%、4.19%及3.04%,受照后6小时出现一凋亡峰值。按0、2、4、8、12、20Gy照射移植瘤,于6h后取出肿瘤,其凋亡指数分别为0.35%、2.36%、3.77%、6.60%、9.93%及13.50%,与细胞系的凋亡指数有明显的差异。同时在移植瘤模型中通过电镜观察到凋亡细胞典型的形态学特征,凝胶电泳出现了特有的DNA梯子。 4:对凋亡不同检测方法进行了比较,我们应用荧光显微镜下观察法、流式细胞仪检测法及TdT末端标记法检测了高能X线诱导CNE
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