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目的:通过实验观察补肾解毒通络方干预实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠急性期及缓解期发病情况、神经功能症状、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-12(IL-12)含量变化的影响,探讨中药对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠急性期及缓解期的治疗作用及可能的抗炎症机制,为中医药对多发性硬化的临床治疗提供实验依据。方法:1、EAE模型的建立:以豚鼠全脊髓匀浆与福氏佐剂为抗原,辅以百日咳杆菌为诱导主动免疫Wistar大鼠建立EAE模型,观察大鼠的发病情况及临床神经功能症状。2、实验的分组及给药:90只雌性wistar大鼠按随机分组分为空白组、模型组、激素组、中药治疗高、中、低剂量组6组,大鼠发病后,以醋酸泼尼松龙为对照物,中药组分别给予不同剂量的中药干预,并观察大鼠的发病情况。3、样本采集:分别于大鼠造模后14天(高峰期)及21天(缓解期)于大鼠眼静脉处采血,置于EP管中离心20分钟,取血清备测;脑及脊髓通过心脏灌注后取出置于4%多聚甲醛中固定,酒精梯度脱水后进行蜡块包埋切片。4、样本测定:病理组织测定采用苏木素-伊红(HE)法染色镜下观察脑、脊髓组织病理改变;细胞因子测定采用ELISA法测定离心后血清不同时间点TNF-α及IL-12的含量。结果:1、本实验成功制作了EAE大鼠模型,除空白组外,余各组之间的发病率及潜伏时间无显著差异;补肾解毒通络方高、中剂量组大鼠发病高峰期、缓解期的平均神经功能评分明显低于模型组(P<0.05)。补肾解毒通络方低剂量组,发病高峰期平均神经功能评分与模型组无显著差异(P>0.05),发病缓解期平均神经功能评分显著低于模型组(P<0.05)。2、通过镜下观察,在发病高峰期与缓解期,中药组CNS炎性病灶数与同时间模型组相比,中药组与激素组大鼠CNS炎性病灶比模型组明显好转。3、补肾解毒通络方高、中剂量组发病高峰期血清TNF-α表达水平较模型组有显著的降低(P<0.05),与激素组相比,无显著的差异(P>0.05);中药低剂量组、模型组之间无明显的差异(P>0.05);发病缓解期中药高、中、低剂量组发病高峰期血清TNF-α含量较模型组及激素组显著降低(P<0.05),跟中药中剂量组相比,中药高、低剂量组明显的升高(P<0.05)。4、补肾解毒通络方各组发病高峰期血清IL-12含量较模型组有明显的降低(P<0.05);与激素组相比,中药中剂量组大鼠血清IL-12含量无明显差异(P>0.05);中药高、低剂量组大鼠血清IL-12含量有明显升高(P<0.05);发病缓解期时,补肾解毒通络方中剂量组血清IL-12含量较模型组有明显的降低(P<0.05),与激素组相比,无明显差异(P>0.05),中药高剂量组、低剂量组明显的升高(P>0.05)。各治疗组与模型组相比均有明显的降低(P<0.05)。结论:(1)补肾解毒通络方可明显减轻EAE大鼠发病急性期的症状、减轻大鼠发病高峰期的神经损害,促进大鼠临床症状的恢复。(2)通过显微镜HE染色观察,补肾解毒通络方可降低EAE大鼠中枢神经系统(CNS)的炎症损伤,减少炎症病变的数量,减轻大鼠的神经功能障碍。(3)补肾解毒通络方能有效的降低EAE大鼠急性期及缓解期血清中的TNF-α及IL-12含量,发现EAE大鼠的神经缺失程度与TNF-α及IL-12含量呈正相关,我们可推断补肾解毒通络方的部分作用可能是下调血清中TNF-α及IL-12在体内的表达,从而抑制Th0细胞向Th1的转化,调节Th1/Th2系统的平衡,以此来控制炎性因子对组织的破坏来达到症状的恢复。