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目的：体外分离、培养人脂肪间充质干细胞与兔角膜内皮细胞，了解这两种细胞体外增值生长特性，并通过共培养诱导人脂肪间充质干细胞向角膜内皮样细胞分化，检测其功能性蛋白质-水通道蛋白1（Aquaporin1，AQP1)的表达，以探讨诱导后的人脂肪间充质干细胞作为替代角膜内皮细胞进行移植手术的种子细胞的可行性。方法：1、从医院手术室获取人体腹部脂肪，通过胶原酶消化、离心等方法分离提取人脂肪间充质干细胞进行培养，观察及描绘细胞生长状态。取P3细胞，用流式细胞仪做表面抗原鉴定。2、揭膜法获取新西兰大白兔眼后弹力层及内皮细胞层，置于细胞培养皿中进行培养，观察及描绘角膜内皮细胞生长状态。取P1细胞，免疫组织化学鉴定角膜内皮细胞的相对特异性蛋白质-神经特异性烯醇化酶(NSE)。3、将兔角膜内皮细胞和人脂肪间充质干细胞分别接种于Transwell上、下两室，共培养10d后，观察诱导后人脂肪间充质干细胞的形态，免疫组织化学鉴定AQP1的表达。结果：1、体外培养的原代人脂肪间充质干细胞7-9d后呈典型的成纤维细胞样，12-14d后铺满瓶底约80%左右，传代细胞增值明显快于原代细胞；细胞生长曲线呈“S”形，3-5d为对数生长期；流式细胞仪结果显示细胞表面抗原CD44阳性率为93.7%，CD34阳性率为1.6%。2、揭膜法培养的原代兔角膜内皮细胞，5d后并形成良好的单层，呈“铺路石子”状，10d后呈漩涡状排列，中央细胞呈三角形及短梭形，传代细胞形态多为六边形或多边形；细胞生长曲线基本呈“S”形，2-5d为对数生长期；免疫组织化学检测细胞NSE表达，胞浆见棕黄色粗大颗粒，染色阳性。3、人脂肪间充质干细胞与兔角膜内皮细胞于Transwell共培养系统中培养10d后，细胞形态无明显改变，免疫组织化学检测诱导后的人脂肪间充质干细胞AQP1表达，胞膜染色呈阳性。结论：通过上述方法可以获得活性较好且纯度较高的人脂肪间充质干细胞和兔角膜内皮细胞；利用Transwell共培养系统可以成功诱导人脂肪间充质干细胞表达角膜内皮细胞功能性蛋白质AQP1；诱导后的人脂肪间充质干细胞将来很有可能作为移植治疗角膜内皮病变和损伤的种子细胞。