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目的金属合金作为口腔修复材料,在人体内对机体会产生一定的毒性作用,抑制细胞的增殖,甚至导致细胞凋亡。本研究对金铂合金、纯钛金属、钴铬合金及镍铬合金4种金属合金对人牙龈成纤维细胞的细胞凋亡进行探讨。通过4种金属合金浸提液处理体外培养人牙龈成纤维细胞,观察其对细胞增殖、细胞周期的影响,进而摸索一种评价医用金属材料生物相容性的新方法。方法1.细胞培养取人健康牙龈组织,用组织块贴壁法对人牙龈成纤维细胞进行原代培养并传代,并用免疫组织化学技术检测培养细胞波形丝蛋白及角蛋白的表达,对细胞进行鉴定。2.流式细胞仪检测细胞周期制备金铂合金、纯钛金属、钴铬合金及镍铬合金4种金属合金浸提液。将4种金属合金浸提液分别加入人牙龈成纤维细胞的培养液中,以含10%小牛血清的DMEM培养液作为阴性对照。培养48小时后进行PI染色,并通过流式细胞仪检测不同实验组中细胞周期的改变。3.Western-blot方法检测Bcl-2和Bax将4种金属合金浸提液分别加入人牙龈成纤维细胞的培养液中,以含10%小牛血清的DMEM培养液作为空白对照。通过Western-blot方法来测定细胞中Bcl-2和Bax的表达量。结果1.人牙龈成纤维细胞的鉴定人牙龈成纤维细胞经免疫组织化学染色,结果为波形丝蛋白染色呈阳性,角蛋白染色呈阴性。证实该细胞符合成纤维细胞来源于中胚层的特点。2.流式细胞仪检测人牙龈成纤维细胞的细胞周期在G0G1期,DNA百分含量逐渐增加;在S期,DNA百分含量逐渐减少;增殖指数也逐渐减小。其中,镍铬合金组的增殖指数（20.91%）较空白对照组（21.76%）小（P<0.05）,提示有统计学差异。其余3组金属合金的增殖指数由大到小依次为金铂合金组（30.22%）>纯钛组（29.85%）>钴铬合金组（29.11%）,均较空白对照组（21.76%）大（P<0.05）,提示有统计学差异。3.金属合金浸提液对人牙龈成纤维细胞中Bcl-2和Bax表达的影响各实验组细胞Bcl-2/Bax比值,在空白对照组、金铂合金组、纯钛组之间差异无显著性意义（P>0.05）,而镍铬合金、钴铬合金与空白对照组之间差异均具有显著性意义（P<0.05）。金铂合金组与纯钛组、镍铬合金与钴铬合金组之间差异也无显著性意义（P>0.05）。结论1.金属合金可以抑制人牙龈成纤维细胞增殖,引起细胞周期的改变。其中金铂合金、纯钛、及钴铬合金对人牙龈成纤维细胞增殖的抑制作用较小,而镍铬合金对细胞的增殖的抑制作用较大。2、金属合金影响人牙龈成纤维细胞中Bcl-2和Bax的表达。其中金铂合金、纯钛及钴铬合金对人牙龈成纤维细胞中Bcl-2和Bax表达的影响较小,而镍铬合金对人牙龈成纤维细胞中Bcl-2和Bax表达的影响较明显。3、对于细胞增殖的影响以及对细胞中Bcl-2和Bax表达的检测可以成为探讨金属合金毒性机理的指标之一。继而,可能成为评价金属生物相容性的新指标。