前言 内皮素(Endothelin，ET)含有21个氨基酸残基，是迄今所知作用最强、持续最久的缩血管活性多肽。其分子量为2492，具有广泛的生物学效应，是一种多功能生理调节肽。内皮素不仅是血管内皮细胞分泌的一种有很强血管收缩及升高血压作用的循环或局部激素，也是神经递质和调节肽，在生物体内参与了各系统的生理功能及多种激素分泌的调节。一般认为内皮素可引起循环激素样作用，主要通过旁分泌、自分泌方式起调节作用，在维持机体内环境稳定性中有着重要意义。其具有调节许多组织的功能，不仅有缩血管作用，对心脏有剂量性正性肌力作用，而且可影响某些血管活性物质的释放，对平滑肌也有收缩作用。在多种动物的离体气管和支气管制备实验中，ET可引起强大的收缩作用。不同部位的平滑肌对ET的敏感性不同，ET对胃肠道平滑肌有兴奋作用。此外，ET也可兴奋离体膀胱、肾盂、输精管、子宫与泌尿生殖道平滑肌。 Oddi括约肌是壶腹胆总管胰管末端的环形平滑肌，其功能紊乱可导致胆汁及胰液逆流，在许多胆胰疾病的病理生理过程起重要作用。目前研究表明，Oddi括约肌功能失调与神经异常、胰胆管结合异常、内分泌或体液等因素有关。而内皮素作为胃肠肽类激素的一种，其对Oddi括约肌功能影响却少有报道。 为此，我们首先观察了ET对兔离体Oddi括约肌的影响，以及ET抗血清对其的拮抗作用，从而为预防和缓解、治疗Oddi括约肌功能失调提供一种新的手段。 材料与方法 离体免Oddi括约肌制备及张力测定。 选用大白兔10只（中国医科大学动物室提供人雌雄不限，体重 3．0－3．5 KG。使用前禁食 10小时，但不禁水，击头处死后，将其固定于手术台上，剪毛后，取上腹正中切口进腹，迅速取出Oddi括约肌，放于冷的通有混合气体万5％O卜5％CO＊的Klebs－Henseleit（K－H）营养液中，去掉过多的脂肪组织后，将其剪成三块宽3－smrn左右的环状，用两个自制三角形小钩将其悬挂于盛有10 InllnlK－H液的浴管中，保持温度37。O．5℃，并持续通人混合气体。Oddi括约肌环的张力变化可通过其上端相连的力一位移换能器记录在台式平衡记录仪上，标本初始负荷为ig，灵敏度为40 ／J’格八，走纸速度为8 1llllvmin，每20min换一次营养液，平衡60－90ndn后，向浴管中加人实验药物。在平衡期间，加人60删 KCL溶液，并把其收缩力作为收缩力 100％，以此作为内皮素的对照。当Oddi括约肌出现节律收缩时，首先按累积加药法加人各浓度问．InM－100nM）的内皮素，观察 Oddi括约肌收缩频率及振幅的变化，完毕后，用新鲜K－H液冲洗标本三次，平衡60分钟左右，使其四至基线，当再次出现Oddi括约肌节律性收缩时，再给予内皮素抗血清门／5000，250ul）孵育5分钟后，按累积加药法加人内皮素，浓度为N．InM－100nM八分别作出其量效曲线图。 实验结果 1．内皮素对离体免Oddi括约肌张力的影响。 按累积加药法向浴管中加入 ET（终浓度为 10－‘’－10刁ML标本出现缓慢而持久的收缩反应。加药后至Oddi括约肌收缩，其 ·2·潜伏期平均为瞩．2。3．门 min，从 Oddi括约肌开始收缩至有明显收缩时K．5。2．4）min，后张力稳定O0．8。10．6）min．当内皮素处于低浓度时，Oddi括约肌表现为收缩频率加快，张力增强，当浓度达到10＊汕时，出现强直性收缩。结果显示上T能收缩静息状态下的Oddi括约肌，其作用强．度随ET浓度的增加而增强。k＝8，XfS） 2．内皮素一且抗血清对正＊一所引起 Oddi括约肌作用的影0。 在K－H液中加人内皮素一l抗血清O乃50，250ulX孵育5分钟后，按累积加药法加人内皮素一1（终浓度为10－’‘－10刁M人结果表明，内皮素一1抗血清对内皮素所致的Oddi括约肌收缩反应呈抑制作用，使其量效曲线下移，最大反应降低。k＜o对门 讨 论 ET是1988年日本学者从猪主动脉内皮细胞培养液中发现的一种强有力的血管收缩肽，因其是血管内皮细胞分泌产生的内皮收缩因子，故称为内皮素。它是迄今所知作用最强、持续最久的缩血管活性多肽，由21个氨基酸构成。 内皮素作用极其广泛，有多种生物学效应。在心血管疾病、肝胆、胃肠疾病等的发生发展中起重要作用。在生理状态下ET调节肠道平滑肌及血管平滑肌的舒缩。 内皮素包括ET一二、ET－2、ET－3和VIC（血管收缩因子）4种异性肽形式，生物活性以ET一二最强，ET－3最弱。多种因素可影响内皮素水平：缺血、缺氧、再灌注、灌流量增加、高脂血症和内毒素都明显促进内皮素释放。在某些病理条件下，不仅ET大量释放，而且机体对ET反应性增加，促进该病理过程的恶性循环。内皮素主要分布血管内皮细胞，血液中的内皮素主要为ET－ ·3·且。 内皮素受体为ETA，ETB，ETC三类上TA受体是ET一选择性受体，主要分布于血管平滑肌，介导血管收缩，ETB?