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已知N类门控Ca2+通道（CaV2.2）在突触前神经末梢的神经递质释放中起了关键性的作用。生理学、形态学及超微结构研究均提示N类Ca2+通道与神经递质释放结构紧密相邻。既往对CaV2.2结构的不同肽段研究提示:CaV2.2有一个具有长的羧基端尾部的剪接变体,CaV2.2-L,对神经递质释放位点具有优先的靶向作用。这个延伸的尾部剪接变体具有和模块衔接蛋白CASK（钙/钙调蛋白依赖的丝氨酸蛋白激酶）和Mint结合的位点。有人应用培养的海马神经元研究发现:敲除衔接蛋白结合的位点可以导致钙通道在突触前的聚集下降,结合以往的研究结果:CASK和Mint存在于神经突触前膜,于是人们推测:模块衔接蛋白CASK在Ca2+通道长剪接变体向突触前膜神经递质释放位点的靶向锚定中起到了关键性的作用。为了检测CaV2.2-L在突触前神经末梢内所起的作用,我们针对CaV2.2-L的长羧基端片段制备了两种抗体:L4569和L4570。并进行了以下实验:第一部分:检测L4569和L4570是否为针对钙通道的抗体。首先,我们应用western blot方法检测新制备抗体的分子量;其次,应用免疫共沉淀方法检测L4569和L4570是否与已知的钙通道抗体Ab571共沉淀。再次,应用鸡胚睫状神经节（因其钙通道均为N类钙通道）的伞状的突触前神经末梢（又称calyx）检测CaV2.2-L是否神经递质释放面内:采用poly-mono免疫组织化学方法将L4569和L4570与已知钙通道结合蛋白syntaxin共染色以检测其在突触前膜的分布;采取poly-poly免疫组织化学方法检测L4569和L4570是否与Ab571和已知的神经递质释放位点标记蛋白Rim2共区域化（colocalazation）。第二部分:CASK与CaV2.2-L关系的研究:应用免疫共沉淀方法检测CASK是否与CaV2.2-L共沉淀;应用calyx形状的鸡胚睫状神经节突触前神经末梢进行免疫组织化学染色,并进行定量分析,以检测CASK与L4569和L4570是否在神经递质释放面内共区域化及CASK与已知